馬鈴薯抗病毒、類病毒轉(zhuǎn)基因研究.pdf

1、馬鈴薯是全球最重要的糧食作物之一，也是我國(guó)北方的重要栽培作物。但在目前的馬鈴薯生產(chǎn)過(guò)程中，病毒性病害已成為馬鈴薯種薯退化及產(chǎn)量減少的主要因素，給馬鈴薯生產(chǎn)造成巨大損失。近年來(lái)，基因工程技術(shù)的發(fā)展為培育馬鈴薯抗病品種提供了一條經(jīng)濟(jì)有效的途徑。
　　 本試驗(yàn)利用根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)的轉(zhuǎn)基因技術(shù)，以馬鈴薯52E、79-09、3-105的莖段和葉片作為外植體進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化研究。在優(yōu)化轉(zhuǎn)基因體系的基礎(chǔ)上，將抗馬鈴薯卷葉病毒的RNAi基因和特異切割

2、馬鈴薯紡錘塊莖類病毒的核酶基因?qū)肓笋R鈴薯。主要研究結(jié)果如下:
　　 (1)以馬鈴薯的莖段和葉片作為外植體轉(zhuǎn)化，莖段和葉片的平均愈傷誘導(dǎo)率分別為77.1％和67.2％，說(shuō)明莖段及葉片均可以作為遺傳轉(zhuǎn)化的受體材料;
　　 (2)對(duì)轉(zhuǎn)化前的馬鈴薯進(jìn)行預(yù)培養(yǎng)和熱激處理，會(huì)提高轉(zhuǎn)化效率;
　　 (3)農(nóng)桿菌與外植體的共培養(yǎng)時(shí)間對(duì)后期抑菌的影響很大，本試驗(yàn)中確立共培養(yǎng)時(shí)間為3d;
　　 (4)對(duì)獲得的再生植株進(jìn)行P