成纖維細胞與明膠海綿支架三維共培養(yǎng)的實驗研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:應用組織塊法體外培養(yǎng)原代成纖維細胞,觀察細胞形態(tài)、生長特點、增殖能力以及細胞與醫(yī)用可吸收明膠海綿體外共培養(yǎng)情況,為進一步研究成纖維細胞在組織工程學的應用打下基礎(chǔ)。
　　 方法:取4-6月齡新西蘭大白兔,取其皮下筋膜組織,組織塊法培養(yǎng)原代成纖維細胞。傳代至第3代。倒置顯微鏡觀察細胞形態(tài),免疫組織學染色后共聚焦顯微鏡觀察細胞形態(tài),分別應用MTT和CCK8試劑盒研究細胞生長增殖規(guī)律,并對兩種方法進行比較,Ⅰ/Ⅲ型膠原蛋白染色觀察

2、其分泌蛋白情況,PKH26標記下用掃描電鏡觀察成纖維細胞與明膠海綿體外共培養(yǎng)情況。
　　 結(jié)果:用筋膜組織行組織塊法培養(yǎng)可成功得到大量原代成纖維細胞,此法取材廣泛,過程簡單,成纖維細胞于體外培養(yǎng)時增殖活躍。分別用CCK8與MTT法連續(xù)觀察7天,于細胞周期的第4-5天后細胞出現(xiàn)增殖平臺期(平均4.1±2.0天和4.6±1.7天)。兩種方法比較無明顯統(tǒng)計學差異(P＞0.05)。免疫組織學染色后共聚焦顯微鏡觀察可見細胞為典型的成纖維細

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