慢性乙型病毒性肝炎脾胃濕熱證和肝膽濕熱證的microRNA差異表達研究.pdf

1、目的：
　　研究慢性乙型病毒性肝炎脾胃濕熱證和肝膽濕熱證及兩證間的microRNA差異性表達，尋找慢性乙型肝炎脾胃濕熱證與肝膽濕熱證之間轉(zhuǎn)錄后表達調(diào)控的潛在差異表達譜，從分子生物學水平探索該病典型濕熱類證型的本質(zhì)，為中醫(yī)臨床辨證分型及中醫(yī)病位的客觀化提供依據(jù)。
　　方法：
　　本研究采取基因芯片技術(shù)，選擇Agilent19.0芯片進行檢測，并采集慢性乙型肝炎脾胃濕熱證、肝膽濕熱證、無證可辨組及健康對照組的血漿，檢測這些

2、證型的microRNA，分別將脾胃濕熱證、肝膽濕熱證、無證可辨組與健康對照組進行比較，再將比較后的結(jié)果采用集合方式，剔除交集部分，篩選出慢性乙型肝炎脾胃濕熱證和肝膽濕熱證的差異microRNA。采用SPSS20.0系統(tǒng)對所得的年齡、性別、基線指標等進行統(tǒng)計分析，將所得差異microRNA進行靶基因預(yù)測和GO、pathway等富集分析，探討其作用的機制。
　　結(jié)果：
　　1、脾胃濕熱證組和健康對照組比較，共篩選出101條mic

3、roRNAs，63條高表達，38條低表達。其中具有顯著性差異的microRNAs共9條（P＜0.05；FC>2.0倍），6條高表達（P＜0.05；FC>2.0倍），3條低表達（P＜0.05；FC>2.0倍）；
　　2、肝膽濕熱證組和健康對照組比較，共篩選出111條microRNAs，79條高表達，32條低表達。其中具有顯著性差異的microRNAs共17條（P＜0.05；FC>2.0倍），17條均為高表達（P＜0.05；FC>2.

4、0倍）.
　　3、無證可辨組和健康對照組比較，共篩選出116條microRNAs，90條高表達，26條低表達。其中具有顯著性差異的microRNAs共35條（P＜0.05；FC>2.0倍），28條為高表達（P＜0.05；FC>2.0倍），7條低表達。
　　4、脾胃濕熱證、肝膽濕熱證和無證可辨組進行比較，三組共有2條相同的mic roRNAs；脾胃濕熱證與肝膽濕熱證共有2條相同的microRNAs；脾胃濕熱證與無證可辨組共有3

5、條相同的microRNAs；肝膽濕熱證與無證可辨組共有7條相同的micr oRNAs。慢性乙型肝炎脾胃濕熱證的差異microRNAs是：hsa-miR-1273g-3p、hsa-m iR-4419b；慢性乙型肝炎肝膽濕熱證的差異microRNAs是:hsa-miR-129-2-3p、hsa-miR-21-5p、hsa-miR-1304-3p、hsa-miR-129-1-3p。
　　結(jié)論：
　　1、慢性乙型肝炎脾胃濕熱證和肝膽

6、濕熱證兩證型間存在microRNA的差異表達。
　　2、慢性乙型肝炎脾胃濕熱差異microRNAs是：hsa-miR-1273g-3p、hsa-miR-4419b，其特異性的調(diào)控機制可能與mTOR信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路、蛋白絲氨酸/蘇氨酸磷酸酶活性等有關(guān)。
　　3、慢性乙型肝炎肝膽濕熱差異microRNAs是:hsa-miR-129-2-3p、hsa-miR-21-5p、hsa-miR-1304-3p、hsa-miR-129-1-3p