中藥干預(yù)對慢性乙型病毒性肝炎肝郁脾虛證和脾胃濕熱證患者microRNA表達的影響.pdf

1、目的：
　　觀察中藥干預(yù)慢性乙型病毒性肝炎肝郁脾虛證和脾胃濕熱證患者的臨床療效，為中醫(yī)藥有效防治慢性乙型病毒性肝炎提供臨床研究依據(jù)。同時，檢測中藥干預(yù)后慢性乙型病毒性肝炎兩證型相關(guān)microRNAs表達水平的變化，從microRNA層面探討中醫(yī)辨證治療慢性乙型病毒性肝炎的作用機制以及中藥治療的作用靶點，為中藥臨床療效評價提供生物學(xué)依據(jù)。
　　方法：
　　本研究將納入的慢性乙型病毒性肝炎肝郁脾虛證和脾胃濕熱證患者分別隨機

2、分為對照組和治療組。兩證型對照組均使用拉米夫定常規(guī)治療，治療組在使用拉米夫定治療的基礎(chǔ)上，肝郁脾虛證、脾胃濕熱證予以中藥干預(yù)，于治療第0、3、6、9、12、15、18個月檢測患者ALT、TBIL及HBV-DNA。并從中篩選出未發(fā)生耐藥突變的肝郁脾虛證和脾胃濕熱證患者各6例，其中治療組和對照組各3例患者，以及健康志愿者3例，共15例，采用qRT-PCR(探針法)檢測肝郁脾虛證治療前及治療后第6個月的血漿miR-23a-3p表達水平，以及脾

3、胃濕熱證治療前及治療后第6個月的血漿miR-1280表達水平。
　　結(jié)果：
　　1.慢性乙型病毒性肝炎患者HBV-DNA水平與年齡呈負相關(guān)（r=-0.197,P=0.000）。
　　2.治療前，脾胃濕熱證患者ALT水平較肝郁脾虛證者高，ALT≥3×ULN者分別占脾胃濕熱證、肝郁脾虛證總例數(shù)的38％和30%。
　　3.肝郁脾虛證患者治療后各時間檢測點ALT、TBIL、HBV-DNA均較治療前明顯下降，差異具有統(tǒng)計學(xué)

4、意義（P<0.05)。治療后對照組（西藥組）與治療組（中藥加西藥組）比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），但治療組治療后ALT、TBIL、HBV-DNA總體水平低于對照組，且隨時間推移治療組病情更穩(wěn)定，無明顯的反彈現(xiàn)象。
　　4.脾胃濕熱證患者治療后各時間檢測點ALT、TBIL、HBV-DNA較治療前明顯下降，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。治療后治療組與對照組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），但治療組治療后ALT、T

5、BIL、HBV-DNA總體水平低于對照組，隨時間的推移治療組病情更穩(wěn)定，且無明顯的反彈現(xiàn)象。
　　5.納入總病例中，治療組拉米夫定耐藥突變率顯著低于對照組（P<0.05）。肝郁脾虛證中，治療組耐藥突變率較對照組低，兩組耐藥突變率為分別為18.6%和32.3%；脾胃濕熱證中，治療組耐藥突變率較對照組低，兩組耐藥突變率分別為4.1%和13.8%。
　　6.與正常人比較，慢性乙型病毒性肝炎肝郁脾虛證患者miR-23a-3p表達降低

6、，治療后，治療組miR-23a-3p表達水平較治療前顯著升高（P<0.05）；對照組治療前后miR-23a-3p表達水平比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。
　　7.與正常人比較，慢性乙型病毒性肝炎脾胃濕熱證患者miR-1280表達降低。治療后，治療組miR-1280表達水平較治療前顯著升高（P<0.05）；對照組治療前后miR-1280表達水平比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.慢性乙型

7、病毒性肝炎患者HBV-DNA水平與其年齡呈負相關(guān)，隨著年齡的增長而下降。
　　2.中藥聯(lián)合拉米夫定治療慢性乙型病毒性肝炎較單純拉米夫定治療能更有效地改善患者肝功能，抑制病毒復(fù)制，降低HBV耐藥突變率，使病情更穩(wěn)定。
　　3.miR-23a-3p、miR-1280分別與中藥干預(yù)后慢性乙型病毒性肝炎肝郁脾虛證和脾胃濕熱證患者的病情演變相關(guān)。
　　4.miRNA表達水平與中藥干預(yù)后療效的相關(guān)性，進一步證明了miR-23a-3