雞心包積液-肝炎綜合征發(fā)生、流行與疫苗研制.pdf

1、2015年6月以來(lái)，我國(guó)河南、山東、河北、遼寧、安徽、吉林等部分地區(qū)，雞群發(fā)生了不明原因的以心包積液、肝臟腫大為特征的疾病，根據(jù)病變，暫將該病稱為雞心包積液-肝炎綜合征。發(fā)生該病后，迅速開(kāi)展了病因確診、流行病學(xué)調(diào)查與疫苗研制，為該病防控提供了技術(shù)支撐。
　　從不同地方的發(fā)病雞群采集20份病料，利用本實(shí)驗(yàn)室建立的禽腺病毒4型(Fowl adenovirus serotype4，F(xiàn)AdV-4)PCR檢測(cè)方法，發(fā)病雞均能檢出FAdV-4

2、，將陽(yáng)性病料接種9日齡SPF雞胚，獲得1株FAdV分離株SDSX1。用SDSX1株的hexon基因序列進(jìn)行分析表明，SDSX1株與FAdV-4具有較近的遺傳進(jìn)化關(guān)系，用其感染1日齡SPF雞，可復(fù)制出心包積液-肝炎的病變。結(jié)果表明，從雞心包積液-肝炎自然病例分離到的一種FAdV可能與HHS有關(guān)。
　　為了了解HHS在我國(guó)雞群中的流行情況，通過(guò)臨床診斷、分子生物學(xué)檢測(cè)、病毒分離等方法對(duì)2015年9月～2016年12月從全國(guó)收集的50份

3、疑似樣品進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果顯示，50例疑似樣品中FAdV-4陽(yáng)性樣本35份，F(xiàn)AdV-4陽(yáng)性病例中有12例能夠檢測(cè)到AIV，2例能檢測(cè)到NDV，5例能夠檢測(cè)到IBV。通過(guò)SPF雞胚傳代增殖，選取不同地區(qū)的6株進(jìn)行PCR檢測(cè)、血凝性、致細(xì)胞病變?cè)囼?yàn)，并將克隆的6株hexon基因進(jìn)行序列比對(duì)及遺傳進(jìn)化分析。結(jié)果顯示各種品種雞群均可感染發(fā)病，易與AIV混合感染，還可與NDV、IBV混合感染，主要發(fā)生于20～30日齡的肉雞，蛋雞20～70日齡以及2

4、00～300日齡也有發(fā)生，鴨、鵝、鴿子也可感染。分離到的6株病毒均與FAdV-4同源性最高，親緣關(guān)系最近。
　　將分離到的SDSX1株適應(yīng)LMH細(xì)胞，該毒株可在LMH細(xì)胞穩(wěn)定傳代。擴(kuò)繁SDSX1株，測(cè)定其TCID50，經(jīng)甲醛滅活，選用白油為佐劑制備油乳滅活疫苗，并對(duì)該疫苗的物理性狀、安全性、最小免疫劑量進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果顯示:該疫苗具有良好的免疫原性，對(duì)9日齡SPF雞免疫0.5mL即可達(dá)到保護(hù)效果。
　　本研究為HHS的流行病學(xué)