高效液相色譜-二極管陣列-熒光檢測(cè)器串聯(lián)法同時(shí)測(cè)定化妝品中8種性激素的研究.pdf

1、性激素(包括雌激素、雄激素、孕激素)是一種類(lèi)固醇激素，具有控制附性器官和第二性征的生理功能。使用添加性激素的化妝品，短時(shí)間內(nèi)可有增加皮膚彈性、美白、除皺等功效，但長(zhǎng)期使用會(huì)導(dǎo)致色素沉積、皮膚萎縮及人體代謝紊亂，甚至具有致癌性。鑒于化妝品的安全性問(wèn)題，我國(guó)和歐盟等相繼出臺(tái)相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)和法規(guī)，規(guī)范化妝品中性激素的使用，我國(guó)在《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》2007版中還推薦了性激素的測(cè)試方法。為滿足日益增多的性激素組分的監(jiān)測(cè)，各國(guó)科學(xué)家也在積極尋求更加快速

2、靈敏的分析方法。
　　本論文綜合考慮了現(xiàn)有的化妝品中性激素的分析方法和市售化妝品中性激素組分的添加頻率，選取了較具代表性的雌三醇、雌二醇、睪酮、炔雌醇、己烯雌酚、乙酸甲地孕酮、孕酮和丙酸睪酮8種性激素作為研究對(duì)象，系統(tǒng)地研究了其前處理和檢測(cè)方法。在前處理方法的選擇上，針對(duì)溶液狀和乳膏狀化妝品采用了不同的前處理方法；在測(cè)試方法的選擇上，采用高效液相色譜-二極管陣列/熒光檢測(cè)器串聯(lián)法作為測(cè)試手段。通過(guò)優(yōu)化前處理方法和色譜條件，建立了化

3、妝品中8種性激素的簡(jiǎn)便、快速、靈敏的HPLC-DAD/FLD測(cè)試方法。
　　本論文的主要研究?jī)?nèi)容及研究結(jié)果包括：
　　1.本論文以超聲輔助萃取作為手段，分別建立了溶液狀化妝品和乳膏狀化妝品的前處理方法。通過(guò)考察不同提取溶劑和不同提取時(shí)間等對(duì)性激素的提取效果發(fā)現(xiàn)，溶液狀化妝品樣品經(jīng)甲醇超聲提取，萃取液可直接用于HPLC測(cè)定；而對(duì)于基質(zhì)更為復(fù)雜的乳膏狀化妝品，甲醇超聲提取的萃取液需經(jīng)固相萃取小柱凈化方能進(jìn)行HPLC檢測(cè)，并優(yōu)化了

4、固相萃取淋洗液和洗脫液及固相萃取條件。
　　優(yōu)化的溶液狀化妝品前處理?xiàng)l件為：以甲醇為提取溶劑，超聲提取20min；乳膏狀化妝品前處理?xiàng)l件為：飽和氯化鈉溶液分散樣品后，以甲醇為提取溶劑，超聲提取20 min，提取液過(guò)Waters Oasis HLB小柱凈化，以30％甲醇水溶液淋洗，棄去流出液，再用甲醇洗脫并收集洗脫液。
　　2.通過(guò)考察色譜柱、流動(dòng)相種類(lèi)及配比以及洗脫程序、柱溫、流動(dòng)相流速、進(jìn)樣量和檢測(cè)波長(zhǎng)等對(duì)性激素化合物的分

5、離和響應(yīng)值的影響，建立了8種性激素的液相色譜-二極管陣列/熒光檢測(cè)法。確立的色譜條件為：以Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18柱作為分離柱，乙腈和水為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫，DAD采用196nm、242nm和288nm多波長(zhǎng)同時(shí)檢測(cè)。為了避免采用單一的DAD檢測(cè)產(chǎn)生假陽(yáng)性現(xiàn)象，在激發(fā)波長(zhǎng)280nm、發(fā)射波長(zhǎng)310nm的條件下，同時(shí)進(jìn)行了FLD檢測(cè)。以色譜峰的保留時(shí)間定性和外標(biāo)法定量，實(shí)現(xiàn)了8種性激素20min內(nèi)的同時(shí)