高效液相色譜-二極管陣列-熒光檢測器串聯(lián)法同時測定化妝品中8種性激素的研究.pdf

1、性激素(包括雌激素、雄激素、孕激素)是一種類固醇激素，具有控制附性器官和第二性征的生理功能。使用添加性激素的化妝品，短時間內(nèi)可有增加皮膚彈性、美白、除皺等功效，但長期使用會導(dǎo)致色素沉積、皮膚萎縮及人體代謝紊亂，甚至具有致癌性。鑒于化妝品的安全性問題，我國和歐盟等相繼出臺相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)和法規(guī)，規(guī)范化妝品中性激素的使用，我國在《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》2007版中還推薦了性激素的測試方法。為滿足日益增多的性激素組分的監(jiān)測，各國科學(xué)家也在積極尋求更加快速

2、靈敏的分析方法。
　　本論文綜合考慮了現(xiàn)有的化妝品中性激素的分析方法和市售化妝品中性激素組分的添加頻率，選取了較具代表性的雌三醇、雌二醇、睪酮、炔雌醇、己烯雌酚、乙酸甲地孕酮、孕酮和丙酸睪酮8種性激素作為研究對象，系統(tǒng)地研究了其前處理和檢測方法。在前處理方法的選擇上，針對溶液狀和乳膏狀化妝品采用了不同的前處理方法；在測試方法的選擇上，采用高效液相色譜-二極管陣列/熒光檢測器串聯(lián)法作為測試手段。通過優(yōu)化前處理方法和色譜條件，建立了化

3、妝品中8種性激素的簡便、快速、靈敏的HPLC-DAD/FLD測試方法。
　　本論文的主要研究內(nèi)容及研究結(jié)果包括：
　　1.本論文以超聲輔助萃取作為手段，分別建立了溶液狀化妝品和乳膏狀化妝品的前處理方法。通過考察不同提取溶劑和不同提取時間等對性激素的提取效果發(fā)現(xiàn)，溶液狀化妝品樣品經(jīng)甲醇超聲提取，萃取液可直接用于HPLC測定；而對于基質(zhì)更為復(fù)雜的乳膏狀化妝品，甲醇超聲提取的萃取液需經(jīng)固相萃取小柱凈化方能進行HPLC檢測，并優(yōu)化了

4、固相萃取淋洗液和洗脫液及固相萃取條件。
　　優(yōu)化的溶液狀化妝品前處理條件為：以甲醇為提取溶劑，超聲提取20min；乳膏狀化妝品前處理條件為：飽和氯化鈉溶液分散樣品后，以甲醇為提取溶劑，超聲提取20 min，提取液過Waters Oasis HLB小柱凈化，以30％甲醇水溶液淋洗，棄去流出液，再用甲醇洗脫并收集洗脫液。
　　2.通過考察色譜柱、流動相種類及配比以及洗脫程序、柱溫、流動相流速、進樣量和檢測波長等對性激素化合物的分

5、離和響應(yīng)值的影響，建立了8種性激素的液相色譜-二極管陣列/熒光檢測法。確立的色譜條件為：以Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18柱作為分離柱，乙腈和水為流動相進行梯度洗脫，DAD采用196nm、242nm和288nm多波長同時檢測。為了避免采用單一的DAD檢測產(chǎn)生假陽性現(xiàn)象，在激發(fā)波長280nm、發(fā)射波長310nm的條件下，同時進行了FLD檢測。以色譜峰的保留時間定性和外標(biāo)法定量，實現(xiàn)了8種性激素20min內(nèi)的同時