南中國海大亞灣地區(qū)海島漁民高血壓及冠脈病變特征和危險因素分析.pdf

1、目的：
　　1）了解南中國海大亞灣地區(qū)海島漁民高血壓患病基本狀況和同型半胱氨酸水平及內(nèi)環(huán)境變化。
　　2）探討患高血壓的大亞灣地區(qū)海島漁民與大陸漢族冠心病患者臨床特點及冠狀動脈病變的差異，分析差異的相關(guān)原因。
　　3）探討亞甲基四氫葉酸還原酶(MTHFR) C677T基因多態(tài)性與大亞灣地區(qū)海島漁民高血壓患者冠脈病變的關(guān)系，以期為早期發(fā)現(xiàn)高血壓及冠脈病變患者的治療提供一定的參考依據(jù)。
　　4）通過大鼠模型實驗驗證同

2、型半胱氨酸水平和pH值改變對冠狀動脈病變及微血栓形成機(jī)制及意義。
　　方法：
　　1）利用惠州醫(yī)學(xué)會在大亞灣4個漁民居住的海島漁民進(jìn)行慢性病教育，并對該地區(qū)15～80歲的漁民進(jìn)行體檢的資料，完整者有3386人（占總?cè)丝?8％）其中男性1879例(55.5％)女性1707例(44.5％)，平均年齡（40.2±9.4）歲;所有體檢對象均以面對面的方式詢問高血壓既往病史和基本情況，體檢測量體質(zhì)指數(shù)、腰圍等相關(guān)數(shù)據(jù)。均在上午測定血壓

3、，測前安靜坐位5min，使用經(jīng)校正的汞柱臺式血壓計，測量右肱動壓，Korotkoff第1音為收縮壓(SBP)，第五音為舒張壓(DBP)。受檢者連續(xù)3次，每次間隔30s/次，取平均值。Hcy檢測:采集患者的空腹靜脈血，采用高效液相色譜法對患者血漿中的同型半胱氨酸進(jìn)行檢測，所運(yùn)用的儀器為Agilent1200液相色譜儀。
　　2）將冠心病患者分為按其來源地區(qū)分為大亞灣地區(qū)海島漁民組（觀察組）和大陸漢族組（比較組）。記錄和對比兩組患者的

4、臨床特征和冠狀動脈病變特點，具體內(nèi)容包括:性別、年齡、身高、體重、血壓;詢問是否有吸煙、飲酒、高血壓病、高脂血癥、2型糖尿病及心血管病家族史等;測量空腹靜脈血血糖(FBG)、血脂包括TC（總膽固醇）、TG（甘油三酯）、LDL-C（低密度脂蛋白膽固醇）、HDL-C（高密度脂蛋白膽固醇）、apo A1（載脂蛋白a1）和apo B（載脂蛋白B）以及LVEF％（左心室射血分?jǐn)?shù)）;檢測血管病變部位和病變數(shù)目。
　　3）選取海島漁民高血壓患者

5、為觀察組，冠狀動脈造影檢查，A組為造影結(jié)果陰性的高血壓患者140例;B組為造影結(jié)果為陽性的高血壓患者140例，健康體檢者140例為C組，采用聚合酶鏈反應(yīng)邛艮制性片段長度多態(tài)性(PCR-RFLP)法進(jìn)行基因多態(tài)性的檢測，高效液相色譜化學(xué)法檢測血漿總同型半胱氨酸(THcy)濃度，并檢測血液生化指標(biāo)等，比較分析各組基因多態(tài)性和同型半胱氨酸水平差異。
　　4）月桂酸鈉誘導(dǎo)構(gòu)建大鼠冠狀動脈微血栓模型，通過分離血管內(nèi)皮細(xì)胞，并在不同pH條件的

6、培養(yǎng)基中培養(yǎng)24小時。ELISA檢測培養(yǎng)基中血管性假血友病因子（vWF）的含量。利用Real-time PCR和western blot在mRNA及蛋白水平檢測凝血酶原酶(FGL2)的表達(dá)情況。綜合評價pH改變對大鼠冠狀動脈微血栓形成的作用。
　　5）高同型半胱氨酸血癥對內(nèi)皮細(xì)胞和血管鈣化影響作用機(jī)制的實驗。首先，人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)進(jìn)行培養(yǎng)，然后進(jìn)行不同濃度的Hcy(0、0.01、0.1、1、3、5 mmol/L)及不

7、同作用時間(3、6、12、24h)。采用流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡率。同時，建立和導(dǎo)入高同型半胱氨酸血癥以檢測總血漿Hcy水平和判斷血管鈣化程度對大鼠血管鈣化研究的模式。
　　結(jié)果：
　　1）高血壓患病率，體檢資料完整的3386名海島漁民中，高血壓患者516人，高血壓粗患病率15.24％，標(biāo)準(zhǔn)化13.00％。血壓處于正常高值者1057人，占31.22％，其中15～39歲536人，占該年齡段總調(diào)查人口的46.21％。漁民高血壓患者

8、中隨血壓升高Hcy水平增高，血液pH值隨血壓升高而降低。
　　2）危險因素分析，把單因素分析中具有統(tǒng)計學(xué)意義的變量納入多因素非條件Logistic回歸模型。定義進(jìn)入模型的顯著性水平為0.2，剔除變量的顯著性水平為0.05。結(jié)果表明飲酒、吸姻、婚姻狀況、高血壓家族史、鹽攝入量是高血壓的危險因素。
　　3)吸煙、飲酒以及血脂異常是大亞灣地區(qū)海島漁民冠心病患者主要危險因素，OR值分別達(dá)到3.69、2.83和2.59，具有統(tǒng)計學(xué)意義

9、(P=0.000);男性、吸煙以及飲酒冠心病比率分別達(dá)到66.0％、42.0％和57.0％，顯著高于大陸漢族冠心病患者(P=0.000)，女性、肥胖、高血壓、糖尿病、以及血脂異常漁民比率均顯著低于大陸組(P=0.000); TG為（2.47±0.73）mmol/L，顯著高于大陸組(P=0.000);HDL-C為（0.89±0.32）mmol/L，顯著低于大陸組(P=0.000);冠脈單支病變例率為70.0％，顯著高于大陸組(P=0.00

10、0)，多支病變例數(shù)為30.％，顯著低于大陸組(P=0.000); LCX部位病變率為30.0％，顯著高于大陸組(P=0.000)，而LAD部位病變率為32.0％，顯著低于大陸組(P=0.000)。病變以鈣化為主。
　　4）B組HCY[(21.6±9.02)μmol/L]較A組[(15.62±10.5)μmol/L]、C組[(9.7±4.19)μmol/L]顯著升高，T/T型HCY[(21.38±11.02)μmol/L]較C/T型

11、[(18.37±8.46)μmol/L]、C/C型[(15.51±8.24)μmol/L]顯著升高，T/T型Gensini評分（51.8±7.4）顯著高于C/C基因型、C/T基因型，B組MTHFR基因C/T型頻率(36.43％)顯著高于A組(22.86％)。
　　5)根據(jù)ELISA實驗結(jié)果，與對照組相比，模型組動物的內(nèi)皮細(xì)胞中vWF表達(dá)量要明顯升高，這也是血栓形成的一個標(biāo)志，進(jìn)一步在不同pH的培養(yǎng)基中培養(yǎng)分離得到的血管內(nèi)皮細(xì)胞，可

12、以看出，在較低pH的培養(yǎng)基中，vWF的表達(dá)量要高于pH7.2-8.0組。
　　6）ELISA檢測vWF的表達(dá)量（pg/ml， X±SD）分別是(336.67±24.95);(311.33±14.98);(359.67±39.63);(354.67±49.01);(332.00±33.42),而在模型組vWF的表達(dá)量分別是(570.00±57.94);(524.67±57.94);(437.00±95.38);(415.33±44.

13、38);(444.67±74.31)。模型組不同pH條件培養(yǎng)下，F(xiàn)GL2 mRNA的相對表達(dá)量分別為:(7.93±0.93);(6.70±0.70);(5.03±0.32);(5.13±0.40);(5.57±0.83)。
　　7) Hcy濃度的增加，細(xì)胞凋亡率和細(xì)胞均顯著增加氧自由基的產(chǎn)生，且差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.000)。與對照組相比，鈣化組血管鈣含量、堿性磷酸酶活性和骨鈣含量均增加(p=0.000)。
　　結(jié)論：

14、
　　1）調(diào)查顯示大亞灣地區(qū)特定人群（海島漁民）的高血壓標(biāo)化患病率為13.00％，與全省和全國水平基本一致;高血壓患病率呈低齡化趨勢，高峰在35～39歲(37.42％)，30～64歲組均呈高患病率(＞10％);通過Logistic回歸分析發(fā)現(xiàn)，飲酒、吸煙、婚姻狀況、高鹽膳食、高血壓家族史為海島漁民高血壓患病的危險因素。資料分析中發(fā)現(xiàn)，大亞灣海島漁民體內(nèi)同型半胱氨酸濃度隨血壓的水平而改變，強(qiáng)烈提示漁民血壓水平與血液同型半胱氨酸濃度呈

15、正相關(guān)，意外發(fā)現(xiàn)漁民高血壓患者中，血液pH值偏低。通過分析結(jié)果，顯示大亞灣海島漁民這類群體，其血壓變化和相關(guān)病變差異性是由于體內(nèi)同型半胱氨酸濃度的變化和pH值的改變具有共同疊加作用機(jī)制。
　　2）大亞灣地區(qū)（高血壓患病率為15.24％，標(biāo)準(zhǔn)化13.00％）漁民高血壓Logistic分析的危險因素亦有所不同，但“發(fā)病年齡提前”的趨勢基本一致，并且都源于膳食結(jié)構(gòu)和生活方式。值得注意的是，調(diào)查漁民青壯年血壓值均處于正常高值，若干年后青壯

16、年患病率不容樂觀，應(yīng)引起重視。
　　3）與大陸漢族比較，大亞灣地區(qū)海島漁民的主要危險因素是吸煙、飲酒和以TG升高以及低HDL-C為主的血脂異常，其臨床特點為男性患者比例高，肥胖、高血壓和糖尿病發(fā)生率低;冠狀動脈病變主要為單支病變，受累部位主要為左前降支和左回旋支，冠脈病變大多以鈣化病變?yōu)橹?，呈彌漫性，雖然提示冠心病常見的危險因素并沒有特異性，而冠狀動脈病變特點具有地域性和人群的差異性。由于尚未見相關(guān)方面的研究，因此尚無法與他人研究

17、結(jié)果做對比。研究推斷，大亞灣域海島漁民高血壓患者冠脈病變與血液同型半胱氨酸濃度及低pH值呈正相關(guān)，其血壓變化和相關(guān)病變差異性可能與體內(nèi)同型半胱氨酸濃度的變化和pH值的改變有關(guān)。
　　4）亞甲基四氫葉酸還原酶(MTHFR) C677T基因多態(tài)性方面，高血壓合并冠心病患者HCY水平較高血壓病患者有顯著的升高，且C/T基因型頻率顯著高于單純的高血壓病患者，MTHFR C677T等位基因突變率也明顯高于單純的高血壓病患者。其中冠心病病人中

18、，T/T基因型HCY水平、冠狀動脈的Gensini評分均明顯高于C/T基因型、C/C基因型。
　　5）大鼠冠狀動脈微血栓的形成，可以引起vWF的高表達(dá)及分泌，同時，F(xiàn)GL2作為凝血酶原酶，在血栓形成中也明顯上調(diào)，且這種上調(diào)趨勢在低pH條件下更為明顯，提示，低pH環(huán)境是引起心血管疾病的一個因素，這個因素加速致病危險因子的作用。
　　6)同型半胱氨酸能誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡，其影響程度取決于它的濃度和作用時間;高同型半胱氨酸血癥可促進(jìn)