外源性bFGF治療兔下肢慢性缺血的實驗研究.pdf

1、目的：再生治療是血管閉塞性疾病的新療法。本研究目的在探討bFGF生長因子治療兔模型缺血后肢的劑量關(guān)系。通過對48只兔下肢缺血模型的形態(tài)學觀察、DSA計數(shù)側(cè)支血管數(shù)、微血管密度檢測以及微血管/肌纖維束比值的測定，來評價不同劑量bFGF治療兔后肢缺血有效性，篩選：通過肝、腎功能檢測、動脈造影和病理學觀察，評價不同劑量的bFGF治療兔后肢缺血的安全性；bFGF治療兔下肢缺血最佳的劑量。
　　 方法：48名兔被用來建構(gòu)左股動脈切除缺血后

2、肢的模型。對于血管再生法，堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)被分成3組于左股動脈處輸注。實驗兔分為4組，根據(jù)不同的輸注方法。隨機分組，各組12只，分組如下：A組：注射5mlTris緩沖液/只；B組：注射rh-bFGF5ug+5ml Tris緩沖液/只；C組：注射rh-bFGF10ug+5ml Tris緩沖液/只；D組：注射rh-bFGF20ugg+5ml Tris緩沖液/只。四個處理組分別在藥前、給藥后10天、給藥后20天進行三項的試驗

3、檢查：一是靜脈血檢測肝、腎功能檢測；二是采用DSA技術(shù)觀察肢體側(cè)支血管形成；三是采用毛細血管密度、微血管機纖維束比值檢測及病理學觀察
　　 結(jié)果：⑴形態(tài)學觀察：30天后，各處理組動物均無死亡。動物模型制作成功后10天內(nèi)動物下肢有不同程度缺血表現(xiàn)：跋行，缺血肢體毛發(fā)稀疏、顏色暗紅等。模型成功制作10天以后：A組缺血癥狀持續(xù)存在，跋行逐漸加重，1例出現(xiàn)足趾潰瘍壞疽，缺血癥狀最嚴重，B、C、D組用藥后跋行逐漸緩解，手術(shù)創(chuàng)口愈合較對照組

4、良好，無下肢潰瘍壞疽。⑵下肢動脈造影：DSA影像示：對照組兔的肢體切口處沒有產(chǎn)生新生的血管。其他三個處理組有注射bFGF后，血管造影可見到血管“橋”和“網(wǎng)”的大量的形成，在結(jié)扎點的髂外動脈周圍有許多血管“網(wǎng)”和血管“橋”，使髂外動脈與股動脈血流通暢無阻，結(jié)扎點下方的股動脈血管變粗，血管充盈，使缺血損傷的股動脈的血管功能恢復(fù)，骨骼肌內(nèi)、外側(cè)有大量小血管形成。⑶微血管密度和微血管/肌纖維束比值：治療組微血管密度和微血管/肌纖維束比值較對照組

5、明顯增高(P<0.01)。⑷病理觀察：結(jié)扎股動脈后只予以空白處理兔的患肢肌肉中出現(xiàn)有肌纖維變細、斷裂或某些肌束中有缺失肌組織以及脂肪組織浸潤的現(xiàn)象，而在bFGF處理組肌束中則少見這種現(xiàn)象。⑸血肝、腎功能檢測：各組給藥前、給藥后10天、給藥后20天抽取靜脈血檢測血ALT、AST、BLJN、Cr，各組內(nèi)不同時間各項指標檢測值比較差異無統(tǒng)計學意義(p>0.05)。
　　 結(jié)論：①rh-bFGF可有效促進兔缺血肢體血管新生、側(cè)支循環(huán)建立