麥冬多糖抗氧化應(yīng)激及對(duì)炎癥反應(yīng)的保護(hù)作用.pdf

1、目的:
　　 糖尿病已經(jīng)成為危害人類健康的第二大殺手。其中2型糖尿病占了絕大部分。糖調(diào)節(jié)受損是糖尿病的前期病變，發(fā)生率高，易轉(zhuǎn)化為2型糖尿病，又是導(dǎo)致心血管疾病的高危因素。由于糖調(diào)節(jié)受損階段為可逆性階段，因此早期發(fā)現(xiàn)糖耐量受損并予以積極干預(yù)是防治2型糖尿病的有效途徑。本文主要在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)水平研究麥冬多糖對(duì)2型糖尿病大鼠及糖尿病前期大鼠的氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)的保護(hù)作用，探討其降糖機(jī)制；并從細(xì)胞水平考察了麥冬多糖對(duì)H2O2氧化損傷HaC

2、aT細(xì)胞的保護(hù)作用，進(jìn)一步探討麥冬多糖的抗氧化活性，為麥冬多糖的臨床用藥及保健食品的研發(fā)奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
　　 方法:
　　 1．采用STZ誘導(dǎo)建立2型糖尿病模型大鼠，選取體重為100±10g的雄性SD大鼠給予高脂高糖飼料喂養(yǎng)9周誘導(dǎo)大鼠出現(xiàn)胰島素抵抗后，腹腔多次注射鏈脲佐菌素(Streptozotocin，STZ)30mg/kg，建立大鼠2型糖尿病模型，造模成功后，隨機(jī)分4組：糖尿病對(duì)照組(DM)、麥冬多糖給藥組(150

3、mg/kg/d，300mg/kg/d)和陽(yáng)性對(duì)照組(二甲雙胍：200mg/kg/d)。給藥4周后，所有大鼠一次性處死，留取血清、肝臟和腎臟組織?；瘜W(xué)比色法檢測(cè)血清中NO，血清及肝腎組織丙二醛(MDA)的含量、超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)活性；ELISA法檢測(cè)血清中IL-6、IL-8、IL-10含量。
　　 2．選取體重為100±10g的雄性SD大鼠隨機(jī)分為正常大鼠、麥冬多糖預(yù)喂養(yǎng)大鼠和麥冬多糖未預(yù)

4、喂養(yǎng)大鼠。麥冬多糖預(yù)喂養(yǎng)大鼠隨機(jī)分為P-OJPl-100組、P-OJP1-200組和P-OJP1-300組分別以100mg/kg/d，200mg/kg/d，300mg/kg/d劑量的麥冬多糖灌胃4周；其他大鼠給予等量的生理鹽水。4周后，麥冬多糖預(yù)喂養(yǎng)大鼠和麥冬多糖未預(yù)喂養(yǎng)大鼠腹腔多次注射鏈脲佐菌素STZ10mg/kg，造成大鼠糖調(diào)節(jié)受損模型：正常大鼠作為正常對(duì)照組(NC組)腹腔注射等量的檸檬酸緩沖液。造模成功后，麥冬多糖未預(yù)喂養(yǎng)大鼠隨機(jī)

5、分5組：糖調(diào)節(jié)受損對(duì)照組(IGR)、麥冬多糖給藥組(100mg/kg/d，200mg/kg/d和300mg/kg/d)和陽(yáng)性對(duì)照組(二甲雙胍：200mg/kg/d)。P-OJP1組和OJP1組給予麥冬多糖給藥治療(100mg/kg/d、200mg/kg/d和300mg/kg/d)，陽(yáng)性對(duì)照組給予二甲雙胍200mg/kg/d灌胃治療，NC組和DM組給予等量的生理鹽水。4周后，所有大鼠一次性處死。留取血清、肝臟和腎臟組織。化學(xué)比色法檢測(cè)血清

6、及肝腎組織丙二醛(MDA)的含量、超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)活性：ELISA法檢測(cè)血清中IL-6、IL-8、IL-10含量。
　　 3．利用H2O2制備細(xì)胞氧化損傷模型，觀察麥冬多糖的抗氧化作用。運(yùn)用MTT比色法測(cè)定細(xì)胞存活率；化學(xué)比色法測(cè)定培養(yǎng)液中NO含量及細(xì)胞內(nèi)SOD活性和MDA含量。
　　 結(jié)果:
　　 1．糖尿病組大鼠血糖顯著高于正常對(duì)照組(P＜0.01)，麥冬多糖對(duì)糖尿

7、病大鼠有明顯的降糖作用(P＜0.05)，尤其是OJP1-150組，與DM組相比具有極顯著作用(P＜0.01)：麥冬治療組血清及肝腎組織MDA含量明顯低于DM組，SOD、GSH-Px活性明顯高于DM組(P＜0.01)；糖尿病對(duì)照組大鼠的IL-8含量有一定程度的升高(P＜0.05)，與正常組比較IL-6有顯著升高(P＜0.01)。同時(shí)IL-10含量顯著降低(P＜0.01)。在以麥冬多糖給藥治療后，低麥冬劑量組(150mg/kg/d)的IL-

8、6、IL-8的含量都有顯著回落(P＜0.01)，而IL-10的含量顯著回升(P＜0.01)，而且IL-6和IL-10的含量均接近正常水平。
　　 2．糖耐量受損組大鼠血糖顯著高于正常對(duì)照組(P＜0.01)，麥冬多糖對(duì)糖耐量受損組大鼠有明顯的降糖作用(P＜0.05)；麥冬多糖治療組血清及肝腎組織MDA含量明顯低于糖耐量受損對(duì)照組，SOD、GSH-Px活性明顯高于糖調(diào)節(jié)受損對(duì)照組(P＜0.01)；糖耐量受損對(duì)照組大鼠的IL-6、IL

9、-8含量與正常組比較有顯著升高(P＜001)。在以麥冬多糖給藥治療后，IL-6、IL-8的含量都有顯著回落(P＜0.01)，而且IL-6和IL-8的含量均接近正常水平。
　　 3．模型組較正常對(duì)照組細(xì)胞增值活性明顯降低(P＜0.01)。與模型組相比，經(jīng)麥冬多糖處理的細(xì)胞增殖明顯增加，細(xì)胞SOD酶活力上升，NO和MDA的含量顯著降低，與模型組相比有極顯著的差異(P＜0.01)。
　　 結(jié)論:
　　 1．麥冬多糖可能