鐵皮石斛對高糖環(huán)境下HUVECs氧化應(yīng)激損傷的保護(hù)作用.pdf

1、【目的】：
　　研究鐵皮石斛多糖（polysaccharides of dendrobium candidum, PDC）對體外高糖環(huán)境下人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（human umbilical vein endothelial cells, HUVECs）氧化應(yīng)激損傷的保護(hù)作用。
　　【方法】：
　　以體外培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞株為對象，研究了鐵皮石斛多糖對高糖誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞損害的保護(hù)作用。HUVECs用高糖(33.3 mm

2、ol/L)孵育48小時(shí)誘導(dǎo)損傷，同時(shí)用鐵皮石斛多糖（100、200和400μg/mL）處理細(xì)胞48小時(shí)。實(shí)驗(yàn)分為對照組、高糖組、不同劑量鐵皮石斛多糖（100、200和400μg/mL）組和高糖+不同劑量鐵皮石斛多糖（100、200和400μg/mL）組。采用MTT法檢測細(xì)胞活力；收集細(xì)胞上清液檢測培養(yǎng)液中超氧化物歧化酶（superoxide dismutase, SOD）活力和一氧化氮（nitrogen monoxidum, NO）含量

3、；采用流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞線粒體膜電位(mitochondrial membrane potential, MMP)、細(xì)胞內(nèi)活性氧（reactive oxygen species, ROS）和鈣離子水平。
　　【結(jié)果】：
　　33.3 mmol/l高糖環(huán)境下人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞生長受到抑制，細(xì)胞線粒體膜電位（MMP）降低，細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度升高，活性氧（ROS）生成增加，超氧化物歧化酶（SOD）活力降低，一氧化氮（NO）生成減少。但

4、是鐵皮石斛多糖（PDC）能劑量依賴性的有效拮抗上述改變，且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　?。?）與對照組相比，高糖（33.3 mmol/L）組HUVECs細(xì)胞活力顯著降低（P<0.05），MMP顯著性降低（P<0.01），細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度顯著升高（P<0.01），細(xì)胞內(nèi) ROS的水平顯著增加（P<0.05），SOD活力顯著性降低（P<0.05），培養(yǎng)液中NO水平顯著性降低（P<0.05）。
　?。?）與對照組相比，鐵皮石斛多糖（50、1

5、00、200、400和800μg/mL）沒有顯著影響HUVECs的細(xì)胞活力（均P＞0.05）。
　?。?）與高糖組相比，高糖+鐵皮石斛（100、200和400μg/mL）組HUVECs細(xì)胞活力顯著增加（均P<0.05），呈濃度依賴性；細(xì)胞內(nèi)MMP顯著性增加，呈濃度依賴性（均P<0.05）；細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度顯著降低，呈濃度依賴性（均P<0.05）；細(xì)胞內(nèi) ROS的水平顯著降低（P<0.05）；SOD活力顯著性增加（P<0.05）；培