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1、目的:通過(guò)高糖環(huán)境下培養(yǎng)人RPE細(xì)胞建立RPE細(xì)胞的氧化應(yīng)激模型,觀察脂聯(lián)素對(duì)RPE細(xì)胞各氧化應(yīng)激指標(biāo)及凋亡的影響,從而揭示脂聯(lián)素對(duì)RPE細(xì)胞可能的保護(hù)機(jī)制。
方法:將體外培養(yǎng)的人RPE細(xì)胞分為3組:正常對(duì)照組、高糖組、高糖+脂聯(lián)素組,分別干預(yù)24h、48h、72h。在倒置顯微鏡下觀察RPE細(xì)胞形態(tài)變化,采用硫代巴比妥酸法測(cè)定MDA含量,用黃嘌呤氧化酶法檢測(cè)SOD含量和活性,用熒光定量RT-PCR法測(cè)定p66Shc、Ho-
2、1在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)上的表達(dá),通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)RPE細(xì)胞的凋亡率。
結(jié)果:與正常對(duì)照組相比,高糖組MDA含量顯著上升,SOD含量顯著下降(P<0.05),與高糖組相比,脂聯(lián)素組MDA含量顯著下降,SOD含量顯著上升(P<0.05),并且呈時(shí)間依賴性。與正常對(duì)照組相比,高糖組Ho-1mRNA表達(dá)增高;脂聯(lián)素組較高糖組表達(dá)亦增高(P<0.05)。與正常對(duì)照組相比,高糖組p66ShcmRNA表達(dá)增高;脂聯(lián)素組較高糖組表達(dá)降低(P<0
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