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1、目的:研究ESAT-6對(duì)人外周血γδT細(xì)胞表達(dá)IL-17的影響,并對(duì)其信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制進(jìn)行初步探討。
方法:用Ficoll密度梯度離心法從健康人外周血中分離單個(gè)核細(xì)胞,培養(yǎng)3天后用流式細(xì)胞儀分離純化γδT細(xì)胞,并用唑來膦酸及IL-2刺激擴(kuò)增γδT細(xì)胞,12天后用ESAT-6刺激γδT細(xì)胞,并給予信號(hào)傳導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活因子3(STAT3)抑制劑S3I-201,設(shè)置未加入ESAT-6及不加任何抑制劑的對(duì)照組,用PCR法檢測(cè)IL-17、ST
2、AT-3的基因轉(zhuǎn)錄水平,用ELISA法檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)液中IL-17的含量,用Western blot檢測(cè)STAT3蛋白的表達(dá)。
結(jié)果:ESAT-6能顯著提高STAT3及IL-17的基因轉(zhuǎn)錄及蛋白表達(dá)(P<0.01),且S3I-201能顯著抑制ESAT-6所致的γδT細(xì)胞IL-17mRNA的轉(zhuǎn)錄及IL-17的分泌(P<0.01)。
結(jié)論:ESAT-6能提高外周血γδT細(xì)胞IL-17、STAT3的轉(zhuǎn)錄及表達(dá),ESAT-6增
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