IL-17及Th17細胞與系統(tǒng)性紅斑狼瘡關(guān)系的研究及地塞米松對IL-17的影響.pdf

1、第一部分系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者血漿IL-17及IFN-γ的表達水平及其臨床意義
　　目的：探討SLE患者血漿IL-17、IFN-γ水平的變化及其與狼瘡疾病活動的關(guān)系及臨床意義。
　　方法：收集25例SLE患者和22例健康對照者，根據(jù)SLE疾病活動性評分(SLEDAI)將病人分為活動組和非活動組。應用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ABC-ELISA)測定SLE患者和對照者血漿IL-17、IFN-γ水平，并分別與SLEDAI積分、抗ds

2、DNA抗體滴度、補體C3、C4等臨床或?qū)嶒炇抑笜诉M行相關(guān)性分析。
　　結(jié)果：SLE患者血漿IL-17水平(148.24±76.55)pg/ml明顯高于正常對照組(64.59±29.27)pg/ml，血漿IFN-γ水平(35.06±21.80)pg/ml亦高于對照組(13.53±7.94)pg/ml；SLE活動組血漿IL-17明顯高于非活動組和正常對照組(P<0.005和P<0.001)；SLE非活動組患者血漿IL-17水平亦高于正

3、常對照組(P=0.035)。而SLE活動組患者血漿IFN-γ水平與非活動組患者相比，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)?；颊哐獫{IL-17水平與SLEDAI積分呈正相關(guān)(r=0.681，P<0.001)；而血漿IFN-γ水平與SLEDAI無相關(guān)性(P>0.05)。SLE血漿IL-17水平與抗dsDNA抗體水平呈正相關(guān)性(r=0.492，P=0.015)，與補體C3、C4水平呈負相關(guān)性(r=-0.529，P=0.008；r=0.534，P=

4、0.027)；而SLE血漿IFN-γ水平與抗dsDNA抗體、補體C3、C4均未見明顯相關(guān)性(P均>0.05)。
　　結(jié)論：SLE患者血漿IL-17表達水平明顯增高，與疾病活動度SLEDAI評分呈正相關(guān)，且與一些已經(jīng)公認的能夠提示疾病活動性的免疫學指標呈正相關(guān)，如高水平抗dsDNA抗體，低水平的補體C3、C4。提示其可能是反映SLE患者病情活動性的新指標。
　　第二部分系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者外周血單個核細胞中Th17細胞及其它T細

5、胞亞群的表達
　　目的：通過對SLE患者外周血Th17、Tc17、Thl和Tc1細胞亞群檢測，進一步探討Th17細胞在SLE發(fā)病機制中的作用及評價Th17與其它T細胞亞群的關(guān)系。
　　方法：病例和對照同第一部分。分離出SLE患者和正常對照者外周血單個核細胞，按照空白孔、PMA/Ionomycin孔分別培養(yǎng)6小時，運用四色流式細胞術(shù)，檢測SLE患者和正常對照者Th17細胞(CD3+CD8-IL-17+)、Tc17細胞(CD3+

6、CD8+IL-17+)、Th1細胞(CD3+CD8-IFN-γ+)、Tc1細胞(CD3+CD8+IFN-γ+)、雙陽細胞CD3+CD8-IL-17+IFN-γ+、CD3+CD8+IL-17+IFN-γ+比例，評價各個T細胞亞群之間的關(guān)系及Th17細胞與SLE疾病活動度的相關(guān)性。
　　結(jié)果：SLE患者外周血循環(huán)中Th17細胞的比例(2.49±1.49)％顯著高于正常對照(1.47±0.73)％(P<0.001)，SLE活動組患者Th

7、17細胞比例明顯高于非活動組和正常對照組(P<0.05和P=0.001)；SLE患者Th1、Tc17細胞百分率與對照組相比，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；而SLE患者Tc1細胞百分率(44.89±16.43)％明顯高于對照組(31.41±9.06)％(P=0.004)；SLE患者外周血中CD3+CD8-IL-17+IFN-γ+細胞比例(0.51±0.38)％較正常對照組(0.30±0.19)％升高(P=0.047)。Th17與Th1

8、細胞亞群間存在顯著的正相關(guān)性(r=0.527，P=0.007)，而且SLE患者Th17/Th1比值(0.15±0.09)亦高于正常對照組(0.09±0.04)(P=0.021)。SLE患者PBMCs中Th17細胞百分比與SLEDAI呈正相關(guān)性(r=0.426，P=0.034)，而SLE患者Th1、Tc1細胞百分比與SLEDAI均無相關(guān)性(兩者P>0.05)，Th17/Th1比例與SLEDAI亦無相關(guān)性(P>0.05)；SLE腎病組Th1

9、7細胞比例明顯高于無腎病組(P=0.008)；未發(fā)現(xiàn)SLE患者抗dsDNA抗體、血清C3、C4水平、24小時尿蛋白、血沉、C反應蛋白等實驗室參數(shù)與Th17細胞百分比之間的直線相關(guān)性(P均>0.05)。
　　結(jié)論：在SLE發(fā)生和發(fā)展過程中，Th17細胞亞群比例增加可能是SLE發(fā)病中的一個重要的決定因素，Th17細胞可能通過其分泌的細胞因子作用于不同靶細胞，誘導其它細胞因子的產(chǎn)生，從而導致SLE患者機體免疫調(diào)節(jié)功能的紊亂，誘導疾病的發(fā)

10、生。
　　第三部分地塞米松對系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者外周血單個核細胞中T細胞亞群比例及炎癥因子分泌的影響
　　目的：探討地塞米松對SLE患者PBMCs中Th17細胞及其他T細胞表達以及上清液中分泌IL-17、IFN-γ水平的影響，為臨床使用糖皮質(zhì)激素治療SLE提供新的理論依據(jù)和實驗室基礎(chǔ)。
　　方法：病例和對照同第一部分。分離SLE患者和正常對照者PBMCs，按照空白孔、PMA/Ionomycin孔、PMA/Ionomyci

11、n+地塞米松孔分別培養(yǎng)6小時或24小時。運用四色流式細胞術(shù)，檢測SLE患者和正常對照Th17細胞(CD3+CD8-IL-17+)、Tc17細胞(cD3+CD8+IL-17+)、Th1細胞(CD3+CD8-IFN-γ+)、Tc1細胞(cD3+CD8+IFN-γ+)、雙陽細胞CD3+CD8-IL-17+IFN-γ+、CD3+CD8+IL-17+IFN-γ+比例。培養(yǎng)24小時后收集上清，通過ELISA方法檢測PBMCs上清液中IL-17、IF

12、N-γ水平。
　　結(jié)果：無PMA刺激條件下，SLE患者PBMCs培養(yǎng)上清液中細胞因子水平及PBMCs中Th17、Tc17、Th1、Tc1、CD3+D8-IL-17+IFN-γ+、CD3+CD8+IL-17+IFN-γ+細胞亞群的比例與對照組均無顯著差異(P>0.05)；加入PMA/Io刺激后，SLE患者PBMCs分泌IL-17、IFN-γ的水平顯著高于無刺激組(P<0.001)，同樣，加入PMA/Io刺激后，SLE組PBMCs中上

13、述六群細胞比例較無刺激時亦明顯升高(P<0.01)；地塞米松可明顯抑制PMA刺激后的PBMCs分泌IL-17和IFN-γ水平，并顯著降低刺激后的PBMCs中Th17、Tc17、Th1、Tc1細胞比例，其中，地塞米松對SLE患者PBMCs分泌IL-17抑制作用更強。
　　結(jié)論：地塞米松可明顯抑制PMA刺激后的PBMCs分泌IL-17水平和Th17細胞的表達，DEX對Th1細胞分泌的IFN-γ亦有明顯抑制作用，提示DEX通過使Th1/