南寧市郊奶牛乳腺炎相關(guān)研究及其對繁殖性能的影響.pdf

1、奶牛乳腺炎是導(dǎo)致奶牛業(yè)經(jīng)濟(jì)損失最嚴(yán)重的疾病之一。本文對南寧市郊奶牛乳腺炎的發(fā)病情況、致病菌的流行狀況、金黃色葡萄球菌毒性基因的分布、隱性乳腺炎乳汁酶類診斷、治療乳腺炎中草藥制劑組方的確定、乳腺炎疫苗的研制和效果評價以及臨床乳腺炎對繁殖性能的影響等方面進(jìn)行了探索和研究,取得結(jié)果如下:
　　 (1)2005～2009年對南寧市郊某規(guī)?；膛鋈珗瞿膛＿M(jìn)行乳腺炎調(diào)查,平均瞎乳頭的奶牛占11.5％,平均瞎乳頭率3.7％,臨床乳腺炎奶牛平

2、均發(fā)病率8.7％,乳區(qū)平均發(fā)病率3.7％,隱性乳腺炎奶牛平均發(fā)病率48.8％,乳區(qū)平均發(fā)病率19％,此外,臨床乳腺炎和隱性乳腺炎的發(fā)病率隨著胎次的增加而升高。臨床乳腺炎和隱性乳腺炎乳汁致病菌檢出率分別為96％和34％,臨床乳腺炎的主要致病菌是金黃色葡萄球菌(29.5％)、大腸桿菌(25.7％)和新型隱球菌(16.2％),隱性乳腺炎的主要致病菌是金黃色葡萄球菌(32.1％)、凝固酶陰性葡萄球菌(19.7％)和無乳鏈球菌(17.9％),本實

3、驗所用的大多數(shù)抗生素和乳炎消對致病性細(xì)菌都比較敏感,分離的大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的毒性最強,致病率分別為61％和54％。
　　 (2)對39株細(xì)菌的23SrRNA序列進(jìn)行檢測,全部確定為金黃色葡萄球菌,與之前生化鑒定結(jié)果完全一致,PCR結(jié)果檢出了clfA、tsst-1、nuc、fnbA、hla、hlb、cap5、cap8和mecA共九種基因,未檢測出sea、fnbB基因,金黃色葡萄球菌攜帶一種以上毒力基因的現(xiàn)象較為普遍,提示菌

4、株間毒力基因連鎖流行的情況較普遍,并且毒性基因的流行病學(xué)具有一定的地域性。
　　 (3)從奶牛產(chǎn)后兩周到產(chǎn)后十周采集的124個乳樣,同時進(jìn)行細(xì)菌學(xué)檢測和上海隱性乳腺炎檢測(SMT),均為陽性結(jié)果的乳汁確定為隱性乳腺炎(SCM)。結(jié)果顯示,SCM發(fā)病率為26.6％,主要致病菌是金黃色葡萄球,菌(47％)和凝固酶陰性葡萄球菌(27％),SCM乳汁中的MDA濃度和乳酸脫氫酶(LDH)、堿性磷酸酶(ALP)的活性顯著高于正常乳汁,而SC

5、M乳汁中的谷胱甘肽過氧化物酶(GPx)活性顯著低于正常乳汁,SCM乳汁中的超氧化物歧化酶(SOD)和天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)的活性與正常乳汁沒有顯著差異。因此,測定乳汁中的MDA濃度和LDH、ALP與GPx的活性可以作為奶牛隱性乳腺炎診斷的一種方法,并且在一定程度上為探明奶牛乳腺炎的發(fā)病機理提供依據(jù)。
　　 (4)金黃色葡萄球菌對連翹和黃連極度敏感,大腸桿菌對烏梅高度敏感。訶子、黃連對金黃色葡萄球菌的抑制作用最強,最低抑菌

6、濃度(MIC)達(dá)到8mg/mL,烏梅和黃連對大腸桿菌的抑制作用最強,MIC達(dá)到16mg/mL。通過正交設(shè)計,連翹、訶子、烏梅和黃連均能明顯提高對金黃色葡萄球菌和大腸桿菌的抑制作用,可以作為奶牛乳腺炎中草藥組方的主要成分。該組方對金黃色葡萄球菌和大腸桿菌的MIC分別為8mg/mL和16mg/mL。
　　 (5)所研制的兩種金黃色葡萄球菌疫苗對小白鼠的攻毒保護(hù)率達(dá)到60％以上。根據(jù)常規(guī)間接ELISA方法,通過反應(yīng)體系的優(yōu)化,確定了最

7、佳反應(yīng)條件,初步建立了間接ELISA檢測奶牛乳腺炎金黃色葡萄球菌抗體的方法。同時確定了建立的間接ELISA陰陽臨界值(OD=0.28)和建立了標(biāo)準(zhǔn)曲線和回歸方程,回歸方程計算的預(yù)測效價和實際效價基本一致。接種疫苗后7～14天,奶牛血清的特異性抗體效價逐漸升高,疫苗1組奶牛于接種后14天達(dá)到最高峰(1:2995),隨后逐漸緩慢下降;疫苗2組奶牛于接種后21天達(dá)到最高峰(1:2062),隨后逐漸緩慢下降。直至實驗結(jié)束(接種疫苗后第150天)

8、,兩個實驗組奶牛血清的特異性抗體效價仍然高于陰陽臨界值。
　　 (6)對南寧市郊某規(guī)?；膛?52頭2～4胎次的經(jīng)產(chǎn)奶牛產(chǎn)后進(jìn)行臨床乳腺炎的發(fā)病時間和繁殖指標(biāo)的調(diào)查,包括首次配種天數(shù)、配種次數(shù)、首次配種懷孕率、空懷期、產(chǎn)后70天內(nèi)懷孕率、流產(chǎn)率。產(chǎn)后至懷孕之間發(fā)生臨床乳腺炎奶牛的首次配種天數(shù)和空懷期均極顯著多于對照組奶牛(P＜0.01),配種次數(shù)顯著多于對照組奶牛(P＜0.05);首次配種懷孕率顯著低于對照組奶牛(P＜0.05

9、),產(chǎn)后70天內(nèi)懷孕率低于對照組奶牛(P＞0.05),流產(chǎn)率高于對照組奶牛(P＞0.05)。產(chǎn)后至首次人工授精之間發(fā)生臨床乳腺炎奶牛的首次配種天數(shù)和空懷期極顯著多于對照組奶牛(P＜0.01),首次配種懷孕率顯著低于對照組奶牛(P＜0.05)。首次人工授精至懷孕之間發(fā)生臨床乳腺炎奶牛的首次配種天數(shù)和空懷期極顯著多于對照組奶牛(P＜0.01),配種次數(shù)顯著多于對照組奶牛(P＜0.05),首次配種懷孕率顯著低于對照組奶牛(P＜0.05)。結(jié)論