奶牛乳腺炎快速診斷技術(shù)的應(yīng)用與隱性乳腺炎診斷指標的探索.pdf

1、奶牛乳腺炎一直困擾著奶牛養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，是造成奶業(yè)經(jīng)濟損失最主要的原因之一。導致奶牛乳房發(fā)生炎癥的因素有很多，其最主要是山于病原微生物感染引起的。在病原微生物鑒定技術(shù)方面，分離鑒定法是應(yīng)用最早也最具權(quán)威的方法，體細胞數(shù)(SCC)也被認為是反映奶牛乳房健康狀況的最重要的診斷指標。近年來，多種新的病原鑒定技術(shù)應(yīng)用到奶牛乳腺炎病原微生物的鑒定，同時對乳腺炎新的診斷指標的探索也從未停止。本研究對河南省內(nèi)奶牛乳腺炎病原流行情況進行調(diào)查，同時應(yīng)用分離

2、鑒定法和微流控基因芯片法進行病原鑒定，然后對隱性乳腺炎乳汁進行乳汁急性期蛋白、乳酶、乳成分等分析，對患病牛只血液進行血常規(guī)分析，旨在探索奶牛乳腺炎病原流行情況和乳腺炎對乳汁急性期蛋白、乳酶、乳成分、血常規(guī)指標的影響，以期為新的診斷指標的發(fā)現(xiàn)提供參考。在此過程中，嘗試了對應(yīng)用軟件的開發(fā)，旨在提高診斷效率，更好的為牧場服務(wù)。本研究主要包括以下試驗和內(nèi)容:
　　研究一:河南省內(nèi)奶牛乳腺炎病原流行情況調(diào)查和奶牛乳腺炎病原分子快速診斷技術(shù)的

3、應(yīng)用。參考牧場DHI報告、CMT和DeLava便攜式體細胞測定儀，采集省內(nèi)27家牧場185頭/份乳腺炎樣品，利用分離鑒定法和微流控基因芯片法進行病原菌鑒定。結(jié)果顯示:檢出率最高的病原是乳房鏈球菌(40.20％)、牛棒狀桿菌(2647％)、無乳鏈球菌(1176％)、大腸桿菌(6.21％)、支原體(621％)等，其中乳房鏈球菌、牛棒狀桿菌、大腸桿菌為環(huán)境性病原微生物;無乳鏈球菌、支原體為傳染性病原微生物。結(jié)果提示:河南省內(nèi)傳染性病原微生物導

4、致的奶牛乳腺炎得到控制，但仍需警惕。環(huán)境性病原微生物的高檢出則需要牧場通過進一步提高飼養(yǎng)管理來改善。研究二:奶牛隱性乳房炎診斷指標的探索。探索了奶牛乳腺炎對乳汁急性期蛋白、乳酶、乳成分、血常規(guī)等指標的影響，并做和SCC的相關(guān)性分析。根據(jù)牧場DHI報告，選擇月度平均SCC較高的牧場，參考CMT，利用DeLava便攜式體細胞測定儀篩選SCC＜50×104/mL的牛只20頭，SCC＞50×104/mL的牛只28頭，取其乳汁和血液進行分析。研究

5、表明:兩組奶牛乳中HP、SAA、AGP、CRP含量均差異顯著（P＜001），同時乳汁中HP、SAA、AGP、CRP含量與SCC呈極顯著正相關(guān)(P＜0.01)，相關(guān)性系數(shù)(r)分別為:HP(r=0806)、SAA(r=0.662)、AGP(r=0.604)、CRP(r=0.717)。兩組奶牛乳中LDH、MPO、NAG、CAT活性差異極顯著(P＜0.01)，且乳汁中LDH、MPO、NAG、CAT活性與SCC呈極顯著正相關(guān)(P＜0.01)，相

6、關(guān)性系數(shù)(r)分別為:LDH(r=0.729)、MPO(r=0.433)、NAG(r=0932)、CAT(r=0.430)。乳中乳糖含量在發(fā)生隱性乳腺炎前后差異極顯著（P＜0.01），與SCC呈極顯著正相關(guān)（r=0.765，P＜0.01）。不同組奶牛血液中平均紅細胞血紅蛋白濃度(MCHC)差異極顯著(P＜0.01)，同時MCHC與SCC呈極顯著正相關(guān)(r=0.413，P＜001)。結(jié)果提示:乳汁中HP、SAA、AGP、CRP含量均有可能

7、作為奶牛隱性乳腺炎的診斷指標;乳汁中LDH、MPO、NAG、CAT活性均有可能作為奶牛隱性乳腺炎的診斷指標。LDH、NAG活性與乳汁SCC相關(guān)性最高，但其具體診斷指示量還需進一步研究。本研究提示乳糖可以作為診斷隱性乳腺炎的參考，但還需要進一步研究。奶牛發(fā)生隱性乳腺炎前后，血常規(guī)變化的相關(guān)研究較少，MCHC是否可以作為奶牛隱性乳腺炎的指示指標還有待進一步研究。
　　研究三:奶牛乳腺炎信息化診斷平臺的研究與開發(fā)。在河南省奶牛乳腺炎病原

8、流行情況調(diào)查過程中，為了提高乳腺炎檢測報告的生成效率，故設(shè)計并開發(fā)《奶牛乳腺炎檢測報告生成系統(tǒng)》1套。同時，為了實現(xiàn)奶牛主要疾病的查詢和奶牛疾病的診斷，開發(fā)《奶牛專家系統(tǒng)》1套。研究內(nèi)容:《奶牛乳腺炎檢測報告生成系統(tǒng)》可根據(jù)輸入的檢測結(jié)果，自動從系統(tǒng)出針對性的防治建議，并自動排版生成檢測報告?！赌膛＜蚁到y(tǒng)》根據(jù)奶牛產(chǎn)奶生產(chǎn)過程中實際發(fā)生的疾病情況，結(jié)合相關(guān)文獻信息綜合形成奶牛疾病管理系統(tǒng)的知識庫，并根據(jù)使用者輸入的信息進行奶牛疾病的診