腦脊液Notch1、DLL1的檢測(cè)在中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病中的臨床價(jià)值.pdf

1、背景與目的：
　　 結(jié)核性腦膜炎(Tuberculousmeningitis，TM)是臨床上常見(jiàn)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病之一，近年來(lái)發(fā)病率有增加的趨勢(shì)，正確的診斷、早期的治療是決定預(yù)后的重要因素。由于臨床抗生素的大范圍使用和腦膜炎臨床表現(xiàn)往往不典型而且復(fù)雜多變，細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)因周期過(guò)長(zhǎng)，加上敏感度低，病原菌檢出困難等，往往不利于早期診斷，容易誤診和漏診。
　　 Notch信號(hào)屬于進(jìn)化上保守的轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，參與胚胎的發(fā)展和自我更新

2、，以及調(diào)節(jié)細(xì)胞的命運(yùn)，是生物發(fā)育中必不可少的途徑。而且，這條途徑涉及各信號(hào)之間復(fù)雜的相互作用，與許多疾病的病理生理過(guò)程相關(guān)。DLL1是Notch受體的配體之一，其功能缺失可能導(dǎo)致胚胎死亡，但DLL蛋白水平的變化，在疾病中的作用研究甚少。
　　 我們前期的工作發(fā)現(xiàn)，TM患者血清和腦脊液(CerebrospinalFluid，CSF)中DLL1水平顯著升高，具有較重要的診斷意義。在此基礎(chǔ)上，本研究將繼續(xù)采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(Enzy

3、meLinkedImmunosorbentAssays，ELISA)和WesternBlot的方法檢測(cè)中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病患者CSF中可溶性Notch1和DLL1的水平，探索新的TM的診斷方法。
　　 對(duì)象和方法：
　　 選取鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科2008年7月-2012年3月住院行腰椎穿刺術(shù)的患者289例，根據(jù)臨床診斷進(jìn)行分組。其中TM組127例。非TM的感染性腦（膜）炎對(duì)照90例，包括化膿性腦膜炎組（Puru

4、lentmeningitis，PM）10例，病毒性腦膜炎組(Viralmeningitis，VM)65例，新型隱球菌性腦膜炎組（Cryptococcusneoformansmeningitis，CM）15例。非感染性神經(jīng)系統(tǒng)疾病對(duì)照組72例，選擇同期入住排除中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染的患者，包括吉蘭-巴雷綜合征(Guillain-Barresyndrome，GBS)20例，多發(fā)性硬化(Multiplesclerosis，MS)25例，阿爾茨海默病

5、(Alzheimerdisease，AD)8例，低顱壓頭痛10例，緊張性頭痛9例。本研究經(jīng)鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，患者均簽署知情同意書(shū)。采用ELISA和WesternBlot的方法檢測(cè)各組CSF中可溶性Notch1、DLL1的含量和表達(dá)。
　　 結(jié)果：
　　 1.各組腦脊液中可溶性Notch1的含量，TM組也明顯高于其余各組(P＜0.01);以Notch1≥8.50pg/ml作為T(mén)M的判斷值，其敏感度為8

6、6.8％，特異性為85.2％，但是此標(biāo)準(zhǔn)對(duì)于隱球菌腦炎區(qū)分較差，其余各組之間相比均無(wú)顯著差異(P＞0.05)。
　　 2.各組腦脊液中可溶性DLL1的含量，TM組顯著高于其余各組(P＜0.01);以DLL1≥0.77ng/ml作為T(mén)M的判斷值，其敏感度為100％，特異性為96.9％，其余各組之間相比無(wú)明顯差異(P＞0.05)。
　　 3.伴發(fā)高甘油三酯與否腦脊液可溶性Notch1、DLL1的含量測(cè)定結(jié)果:TM組伴高甘油三

7、酯、TM組伴正常甘油三酯的CSF中Nocth1含量分別為（6.85±2.32，7.30±1.35pg/ml），兩者相比無(wú)顯著性差異(P＞0.05);其余各組伴高甘油三酯或正常甘油三酯CSF中Nocth1含量相比也無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。TM組伴高甘油三酯、TM組伴正常甘油三酯的CSF中DLL1含量分別為（3.18±2.92，3.62±1.79ng/ml），兩者相比無(wú)顯著性差異(P＞0.05);其余各組伴高甘油三酯或正常甘油三酯CS

8、F中Nocth1含量相比也無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。
　　 4.WesternBlot結(jié)果提示，TM組患者腦脊液中Notch1、DLL-1蛋白有較高的表達(dá)，其余各組患者極少表達(dá)。
　　 5.39例TM組患者隨訪(fǎng)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，37例有效化療治療4周后，CSF可溶性Notch1、DLL1水平顯著下降（5.78±2.87pg/ml，1.89±0.58ng/ml），兩者相比有顯著性差異(P＜0.05)，治療12周可以降至正常水平

9、（0.85±0.62pg/ml，2.05±1.21ng/ml），兩者相比有顯著性差異(P＜0.05)。2例治療效果不佳，CSF可溶性Notch1、DLL1水平未見(jiàn)下降。
　　 結(jié)論：
　　 本研究提示，TM患者CSF中可溶性Notch1、DLL1的含量顯著升高，在VM、PM、隱球菌性腦膜炎和非感染性神經(jīng)系統(tǒng)疾病患者的CSF中可溶性Notch1、DLL1的含量較低或檢測(cè)不到。因此，CSF中Notch1及其配體DLL1含量的