中國(guó)濃香型白酒發(fā)酵黃水中微生物群落結(jié)構(gòu)及多樣性解析.pdf

1、黃水是濃香型白酒釀造的副產(chǎn)物,是窖池微生態(tài)系統(tǒng)的重要組成部分,介導(dǎo)糟醅及窖泥之間物質(zhì)和能量的交換。黃水不僅含有豐富的糖、蛋白等營(yíng)養(yǎng)成分,醇、酯、酸、酮、醛等多種呈味物質(zhì),還含有大量長(zhǎng)期馴化的益生菌群,在中國(guó)濃香型白酒發(fā)酵中發(fā)揮積極作用。因此,本文在已有的糟醅和窖泥微生物區(qū)系結(jié)構(gòu)研究的基礎(chǔ)上,運(yùn)用傳統(tǒng)培養(yǎng)和構(gòu)建SSU rRNA文庫(kù)的方法探索發(fā)酵黃水中微生物多樣性。
　　采用傳統(tǒng)分離培養(yǎng)方法,分別從黃水中分離得到61株真菌和141株細(xì)

2、菌。SSU rRNA鑒定結(jié)果顯示發(fā)酵黃水中的可培養(yǎng)真菌主要有 Monascus fuliginosus, Penicillium freii, Aspergillus fumigatus, Saccharomyces cerevisiaes, Mucor indicus,其中 Saccharomyces cerevisiaes是黃水中真菌主要類群,占總數(shù)的41.0％?？膳囵B(yǎng)細(xì)菌類群均為厚壁菌門(Firmicutes)、細(xì)菌(Bacill

3、i)綱、芽孢桿菌目(Bacillales)的產(chǎn)芽孢細(xì)菌。依次被分為Staphylococcaceae、Planococcaceae、Paenibacillaceae和Bacillaceae四個(gè)科,Macrococcus、Sporosarcina、Planococcaceae incertae sedis、Solibacillus、Paenibacillus、Bacillus、Brevibacillus及Lysinibacillus等8個(gè)

4、屬。其中Planococcaceae科Lysinibacillus屬(21％)和Bacillaceae科Bacillus屬(58％)為黃水中可培養(yǎng)細(xì)菌菌群的優(yōu)勢(shì)菌。微生物群落多樣性分析結(jié)果顯示,細(xì)菌和真菌群落的多樣性指數(shù)Shannon-weaver(H)分別為1.83和0.95、優(yōu)勢(shì)度指數(shù)4.50和2.16、蓋度指數(shù)100％和100。
　　通過(guò)構(gòu)建黃水微生物克隆文庫(kù)顯示:所獲得的151個(gè)細(xì)菌克隆子分別歸為變形菌門(Proteoba

5、cteria)、軟璧菌門(Tenericutes)、擬桿菌門(Bacteroidetes)、厚壁菌門(Firmicutes)、黏膠球菌門(Lentisphaerae)及放線菌門(Actinobacteria)等六個(gè)門以及一個(gè)未分類類群,其中Firmicutes、Proteobacteria為主要類群,分別占克隆子總數(shù)的(47.6％)和(29.1％)。在種屬分類水平上, Clostridium(25.8％)、Lactobacillus(1

6、5.9％)和Serratia(14.6％)為優(yōu)勢(shì)菌群。隨機(jī)選擇的37株古菌克隆子均屬于廣古菌門(Euryarchaeota)、甲烷微菌綱Methanomicrobia綱,其中以A13為代表Methanosarcina屬古細(xì)菌(59.5％)及以A8為代表的Methanoculleus屬(35.1％)占古菌數(shù)量的絕大多數(shù)。多樣性分結(jié)果顯示:細(xì)菌和古菌克隆文庫(kù)的多樣性指數(shù)Shannon-weaver(H)分別為2.75和0.83、優(yōu)勢(shì)度指數(shù)1