黑花生衣中花色苷的提取分離及結(jié)構(gòu)鑒定.pdf

1、黑花生內(nèi)皮中含有豐富的花色苷色素，但是到目前為止，對(duì)黑花生衣色素的系統(tǒng)研究較少。本文以“黑玉珍”黑花生品種為原料，采用酸性水溶液熱浸提的方法探索了黑花生衣色素的最佳提取條件。然后，采用大孔樹脂對(duì)粗提液進(jìn)行初步分離純化，從七種大孔樹脂中預(yù)選出四種吸附性能較好的樹脂，進(jìn)行了靜態(tài)和動(dòng)態(tài)吸附/解吸動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)研究。并采用HPLC-PDA-ESI-MS/MS分析方法對(duì)黑花生衣中所含花色苷種類和幾種黃酮醇進(jìn)行了結(jié)構(gòu)鑒定。最后利用組合柱層析的方法制備出

2、高純度的黑花生衣花色苷組分和單體。主要研究內(nèi)容和結(jié)果如下：
　　黑花生衣色素對(duì)熱和pH穩(wěn)定性研究發(fā)現(xiàn)，花色苷在高溫和高pH環(huán)境下很不穩(wěn)定?；ㄉ赵谒芤褐械姆€(wěn)定性要優(yōu)于在乙醇溶液中。確定了黑花生果最佳脫皮條件為70℃烘干30min，并測得“黑玉珍”黑花生衣中花色苷總量為8.18mg/g干黑花生衣。料液比為1:50（m/v）對(duì)黑花生衣進(jìn)行兩級(jí)浸提，結(jié)果顯示，黑花生衣色素的最佳提取條件為：酸性水溶液（pH2.0），浸提溫度70℃，浸提

3、時(shí)間20min，在此條件下提取率為7.95mg/g干黑花生衣。
　　從七種大孔樹脂（AB-8、SP-207、LS-305A、LS-305、HP-20、LS-610B和DM-21）中篩選出四種（LS-610B、DM-21、LS-305和HP-20）進(jìn)行靜態(tài)和動(dòng)態(tài)吸附/解吸試驗(yàn)。靜態(tài)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，四種樹脂的吸附等溫線與Langmuir模型能很好地?cái)M合。擬二階動(dòng)力學(xué)模型和粒子內(nèi)部擴(kuò)散模型能很好地描述樹脂的吸附過程。結(jié)合動(dòng)態(tài)吸附和洗脫實(shí)驗(yàn)

4、，確定DM-21樹脂最適合工業(yè)化生產(chǎn)使用，以70％乙醇洗脫得到的黑花生衣花色苷產(chǎn)品純度為5.74%，產(chǎn)率為14.5%（以黑花生衣干重計(jì)）。
　　采用UV-vis、HPLC-PDA/UV-vis和HPLC-PDA-ESI-MS/MS三種方法，從黑花生衣粗提液中鑒定出了7種主要成分，包括4種矢車菊素類花色苷，3種槲皮素類黃酮醇。其中矢車菊素-3-槐二糖苷和矢車菊素-3-接骨木二糖苷是黑花生衣中含量最多的兩種花色苷組分。
　　采用

5、組合柱層析的方法，將黑花生衣粗提液經(jīng)過乙酸乙酯萃取，XAD-7HP大孔樹脂初步層析，ODS介質(zhì)二次層析，制備出三個(gè)不同的組分。確定組分Ⅱ和組分Ⅲ分別為矢車菊素-3-槐二糖苷和矢車菊素-3-接骨木二糖苷。再經(jīng)過ODS-AQ層析制備，由HPLC-PDA（200～600nm）檢測可知兩種花色苷單體的純度分別為97.57%和98.94%。組分Ⅰ為一些較強(qiáng)極性共聚物的混合物，經(jīng)過Sephadex LH-20純化以后得到了一個(gè)較純的組分（保留時(shí)間在