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1、彩色小麥?zhǔn)侵缸蚜9N皮或糊粉層顏色與生產(chǎn)上常用小麥不同的小麥,有紫、黑、藍(lán)、綠、紅等顏色,是珍貴的種質(zhì)資源。許多品系的彩粒小麥已被證實(shí)富含蛋白質(zhì)、氨基酸、對(duì)人體有益的微量元素和抗氧化活性物質(zhì),且麩皮中含有大量的天然色素,具有很高的應(yīng)用價(jià)值和開(kāi)發(fā)前景。本研究以山東農(nóng)業(yè)大學(xué)自主培育的黒粒小麥的麩皮為材料,優(yōu)化了麩皮中花色苷的提取工藝和AB-8型大孔樹(shù)脂對(duì)花色苷的純化工藝,應(yīng)用超高效液相色譜配以串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)對(duì)麩皮中所含的花色苷進(jìn)行了分離與鑒定
2、,同時(shí)對(duì)花色苷的穩(wěn)定性和抗氧化活性進(jìn)行了研究,主要研究結(jié)果如下:
⑴黑粒小麥麩皮中花色苷提取工藝研究。采用酸化乙醇法溶劑提取黑粒小麥麩皮中的花色苷,確定了花色苷的最佳提取工藝條件為:最大吸收波長(zhǎng)為525nm,pH為1.0,體積分?jǐn)?shù)為40%的乙醇作提取劑,在料液比為1:20(g:mL),70℃條件下恒溫浸提60min,提取兩次提取效果最好,得率可達(dá)14.50%。
⑵AB-8型大孔樹(shù)脂對(duì)花色苷的分離純化。通過(guò)AB
3、-8型大孔樹(shù)脂對(duì)黑粒小麥麩皮中花色苷的靜態(tài)吸附和解吸實(shí)驗(yàn),優(yōu)化了吸附和解吸的條件,并用高效液相色譜法對(duì)純化后的色素進(jìn)行了初步的分析。最佳吸附條件為:采用pH為1.0,吸光度值A(chǔ)為0.6的色素溶液進(jìn)行吸附,室溫,當(dāng)26h吸附平衡后測(cè)得AB-8大孔樹(shù)脂的最大吸附率為83%,選擇70%pH為1.0的乙醇溶液7h達(dá)解吸平衡時(shí),解吸率為85.53%。麩皮色素粗提物通過(guò)大孔樹(shù)脂柱純化后色價(jià)E1%1cm=40.89,色價(jià)比粗提取物提高了9.127倍。
4、高效液相色譜法對(duì)純化后的色素進(jìn)行了初步的分離鑒定,分離出四種主要成分,主要為花色苷類物質(zhì)。
⑶花色苷成分的分離鑒定。應(yīng)用超高效液相色譜配以串聯(lián)質(zhì)譜和二極管陣列檢測(cè)技術(shù),采用質(zhì)譜全掃描、子離子掃描、母離子掃描對(duì)麩皮中花色苷進(jìn)行了分離與鑒定。黒粒小麥麩皮中花色苷用50%酸化乙醇(乙醇:水:鹽酸V/V=50:49:1)溶液超聲波提取,SPE C18萃取柱凈化處理,液相色譜分離,質(zhì)譜鑒定。在黑粒彩色小麥麩皮中共鑒定出9種花色苷類化
5、合物包括:矢車菊素-己糖苷、矢車菊素-蘆丁苷、芍藥素-己糖苷、矢車菊素-丙二酰葡萄糖苷、飛燕草素-己糖苷、飛燕草色素-蘆丁苷、錦葵色素-蘆丁苷、芍藥素-蘆丁苷、牽牛花素-蘆丁苷。其中,主要的花色苷為:飛燕草色素-蘆丁苷(26.07%)、飛燕草素-己糖苷(24.20%)、矢車菊素-蘆丁苷(20.49%)。
⑷花色苷穩(wěn)定性研究。pH對(duì)其影響明顯,溫度影響不大,60℃以內(nèi)比較穩(wěn)定。Mg2+、K+和Al3+對(duì)該花色苷有很好的增色、
6、穩(wěn)定作用,Ca2+和Fe2+對(duì)其穩(wěn)定作用影響不大,Cu2+、Zn2+和Fe3+使其明顯褪色。該花色苷耐氧化性、耐還原性差,耐光性好。蔗糖、檸檬酸對(duì)其有明顯的褪色作用,苯甲酸鈉在低濃度(<0.1%)時(shí)對(duì)其基本無(wú)影響,在高濃度(>0.2%)時(shí)有一定的褪色作用,鹽對(duì)其有一定的增色、穩(wěn)定作用。
⑸麩皮中花色苷抗氧化功能的研究。實(shí)驗(yàn)以抗壞血酸作對(duì)照,采用總抗氧化能力、抗超氧陰離子自由基能力、抗活性氧能力3種體外抗氧化模型評(píng)價(jià)了麩皮中
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