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文檔簡(jiǎn)介
1、小麥麩皮是面粉廠主要的加工副產(chǎn)物,我國(guó)小麥麩皮的年產(chǎn)量達(dá)2000萬(wàn)噸以上。它富含多種生理活性物質(zhì),如多糖、低聚糖、植酸和酚類化合物等,而其中主要的活性物質(zhì)有兩大類,即酚類化合物和多糖。研究表明,小麥麩皮提取物具有抗氧化、清除自由基、抗腫瘤、抗菌消炎、降血糖等多種藥理活性。目前,小麥麩皮除少許用于制味精,面包及提取麩皮蛋白外,主要用作飼料,經(jīng)濟(jì)價(jià)值較低。小麥麩皮經(jīng)淀粉酶和蛋白酶處理后,所得的酶解物含有糊精、多糖、多肽和低聚糖,但有關(guān)酶解物
2、的成分和生物活性研究至今未見(jiàn)報(bào)道,并且關(guān)于小麥麩皮堿提物的生物活性報(bào)道也較少。因此,本論文以小麥麩皮為原料,采用淀粉酶和蛋白酶酶解,收集上清液冷凍干燥獲得小麥麩皮酶解物,研究酶解物的生物活性;酶解后的麥麩再用低濃度堿液提取制備小麥麩皮堿提物,研究堿提物的生物活性,為小麥麩皮功能性食品的開(kāi)發(fā)提供依據(jù),為小麥麩皮的綜合利用提供基礎(chǔ)。 主要研究?jī)?nèi)容和結(jié)果如下: 1.以小麥麩皮中殘留的淀粉和蛋白質(zhì)為考察指標(biāo),測(cè)得耐高溫α-淀粉酶
3、酶解粉碎前后50g小麥麩皮的最佳用量分別為0.8g和0.45g,中性蛋白酶的最佳用量則分別為1.5 g和0.5g。50g小麥麩皮經(jīng)淀粉酶和蛋白酶酶解,將酶解液冷凍干燥,獲得小麥麩皮酶解物的得率為8.74%。酶解物中淀粉、蛋白質(zhì)、還原糖和總糖含量分別為0.234%、0.950%、30.08%和68.33%。 2.研究了以酶解后的小麥麩皮為原料提取小麥麩皮堿提液的最佳工藝條件。以小麥麩皮堿提液中阿魏酸量為考察指標(biāo),采用三因素三水平正
4、交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)優(yōu)選了提取工藝。各因素對(duì)阿魏酸量影響的主次順序?yàn)閴A解溫度>堿液濃度>堿解時(shí)間。小麥麩皮堿提液提取的最佳工藝條件為NaOH濃度1%,堿解溫度85℃,堿解時(shí)間4 h。在此條件下,50g麥麩可制得的阿魏酸量可達(dá)406.2mg。在堿提液中直接加入HCl調(diào)pH至2.5,然后經(jīng)過(guò)冷凍,結(jié)晶,解凍,離心,冷凍干燥等處理獲得堿提物I(AHWB I);將堿提液真空濃縮,再用HCl分別調(diào):pH至7和2.5,直接冷凍干燥即得堿提物Ⅱ(AHWB Ⅱ)
5、和堿提物Ⅲ(AHWBⅢ)。三種堿提物的得率分別為6.34%、20.46%、21.02%,三種堿提物中阿魏酸含量分別為8.61%、2.96%、4.02%,多糖含量分別為26.68%、36.24%、36.01%。 3.采用紫外分光光度法、水楊酸法和鄰苯三酚自氧化法研究了小麥麩皮酶解物和三種堿提物的清除自由基活性。結(jié)果表明,EHWB和三種AHWB對(duì)DPPH自由基,羥自由基,超氧自由基都具有良好的清除作用。對(duì)于DPPH·,EHWB的IC
6、50值為3.25mg/mL,當(dāng)濃度為6 mg/mL時(shí),清除率為74.77%;三種堿提物的IC50值分別為0.19mg/mL、0.54mg/mL和0.39mg/mL,當(dāng)濃度為1 mg/mL時(shí),其清除率分別為98.32%、68.32%和75.06%,AHWB I的清除效果最好,AHWBⅢ次之,AHWB Ⅱ最差。對(duì)于·OH,EHWB的IC50為5.81mg/ml,當(dāng)濃度為12mg/ml,其清除率為84.95%;三種堿提物的IC50值分別為1.
7、13mg/mL、1.88mg/mL和1.03mg/mL,當(dāng)濃度為9 mg/mL時(shí),其清除率分別為86.76%、94.03%和67.34%。對(duì)于O2-,EHWB的IC50值為12.08 mg/mL,當(dāng)濃度為30mg/mL時(shí),清除率為73.66%,;AHWB Ⅱ的IC50值為5.98 mg/mL,當(dāng)濃度為10 mg/mL時(shí),清除率76.36%。三種小麥麩皮堿提物對(duì)三種自由基的清除效果均很好,尤其是對(duì)于·OH,其效果幾乎與Vc的相近。
8、 4.采用Schaal烘箱強(qiáng)化氧化法,研究了小麥麩皮AHWB Ⅰ的油脂抗氧化活性。結(jié)果表明,AHWB Ⅰ對(duì)大豆油具有一定的抗氧化活性,其效果弱于2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚(BHT),但在12天以前,其抗氧化效果強(qiáng)于相同濃度的阿魏酸,12天以后,其抗氧化效果弱于阿魏酸,且量效關(guān)系不明顯。第14天時(shí),相對(duì)于空白樣品,添加0.02%的AHWB I對(duì)大豆油過(guò)氧化的抑制率為29.09%。 5.研究了小麥麩皮酶解物和三種堿提物的脂質(zhì)抗氧
9、化活性。結(jié)果表明,EHWB對(duì)紅細(xì)胞的氧化溶血有一定的抑制效果,其IC50值為37.86 mg/mL,當(dāng)濃度為50mg/mL時(shí),其抑制率為64.39%;三種堿提物的IC50值分別為0.623 mg/mL、27.13 mg/mL和0.831 mg/mL,其中AHWB Ⅰ和AHWBⅢ對(duì)小鼠紅細(xì)胞氧化溶血具有強(qiáng)烈抑制作用,當(dāng)濃度為10mg/mL 1.0mg/mL時(shí),其抑制率分別為67.23%和53.51%,當(dāng)AHWB Ⅱ的濃度為時(shí),抑制率僅為2
10、8.29%。EHWB能在一定程度上抑制小鼠肝勻漿中MDA的生成,其IC50值為74.66 mg/mL,當(dāng)EHWB濃度為120 mg/mL時(shí),抑制率為74.88%;三種堿提物能明顯抑制肝勻漿中MDA的生成,其IC50值分別為26.84 mg/mL、40.33 mg/mL和2.91 mg/mL,當(dāng)濃度為10mg/mL時(shí),三種堿提物的抑制率分別為29.56%、24.12%和78.44%,AHWBⅢ的抑制效果最好。 6.采用HSS導(dǎo)致小
11、鼠“陽(yáng)虛”,建立小鼠衰老模型,研究了AHWBⅡ的體內(nèi)抗氧化活性。結(jié)果表明,AHWB Ⅱ能夠有效地提高小鼠的抗氧化能力。與衰老組小鼠相比,AHWB Ⅱ大小劑量組均能在一定程度上提高小鼠血清SOD活性和肝組織SOD活性,但只有AHWBⅡ大劑量組能明顯提高血清SOD活性(p<0.05);AHWB Ⅱ大小劑量組均能明顯的抑制血清MDA的生成(p<0.05),尤其對(duì)于肝組織MDA,AHWB Ⅱ大小劑量組均能起到顯著的作用(19<0.01)。
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