白酒窯泥產(chǎn)香細(xì)菌新種的鑒定及分離菌株的碳源代謝研究.pdf

1、中國白酒源遠(yuǎn)流長，享譽(yù)世界，是蒸餾酒釀造史上的一顆璀璨的明珠。濃香型白酒是白酒中市場份額最高的酒種，在2014年全國的市場占有率在60％左右。濃香型白酒窖泥池中的細(xì)菌產(chǎn)生的小分子的酸、醇或者酯等重要的香味物質(zhì)或者香味前體物質(zhì)對白酒的酒質(zhì)起了決定性的作用，同時微生物作為物質(zhì)代謝和能量代謝的載體在窖泥池中扮演了重要的角色，本文通過選擇性培養(yǎng)基在有氧，微氧，厭氧的條件下分離10年窖泥池中的微生物，并對分離出來的細(xì)菌進(jìn)行了16srDNA的鑒定，

2、對得到的兩個新種進(jìn)行形態(tài)學(xué)、生理生化和分子生物學(xué)等方面的詳細(xì)鑒定，利用Biolog碳源分析儀分析了不同種的菌株的碳源的代謝多樣性，選擇平均代謝強(qiáng)度較大的菌株進(jìn)行單菌株發(fā)酵實(shí)驗(yàn)，通過GC-MS檢測菌株代謝產(chǎn)酸的種類和組成。
　　本研究的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，在10年窖泥池的下層窖泥中分離出的細(xì)菌120余株，一共分為7個屬，分別是Bacillus屬、Domibacillus屬、Rummellibacillus屬、Brevibacillus屬、

3、porolactobacillus屬、 Clostridium屬和Lactobacillus屬。其中Clostridium、Bacillus、Lactobacillus這三個屬是優(yōu)勢屬，占有所有分離菌株的75.8％左右，大多數(shù)細(xì)菌是通過厭氧培養(yǎng)的方式分離得到的。在這些菌株中，F(xiàn)W431和FW731，這兩株菌的16S rRNA與分類地位最為接近的Clostridiumljungdahlii DSM13528T相比，相似度分別是95.0％和

4、94.9％，經(jīng)過一系列形態(tài)觀察，生理生化鑒定，兩株菌鑒定為新種，分別被命名為Clostridium luticellarii和Clostridium cellarii; Biolog碳源分析系統(tǒng)對分離出來的菌株進(jìn)行了全面的碳源利用能力分析，結(jié)果表明，這些菌株都表現(xiàn)出來較大的碳源利用差異。在對菌株的發(fā)酵液的結(jié)果檢測中，發(fā)現(xiàn)菌株RCM09和MRS61都有較為廣泛的產(chǎn)生小分子酸的能力，其中，RCM09可產(chǎn)生乙酸、丙酸、丁酸和丁二醇等小分子的酸