抗腫瘤用白藜蘆醇-聚合物載體的制備及其載藥性能研究.pdf

1、目前，化療是治療癌癥的重要手段之一，但在化療過程中抗癌藥物往往存在使用量大、選擇性差、毒副作用強等缺點。因此，如何建立高效抗癌藥物輸送體系，提高腫瘤藥物靶向性，增強藥物生物利用度，解決體內(nèi)耐藥性等問題顯得尤為重要。在癌癥用藥治療過程中，藥物高效與否不僅與藥物本身性質(zhì)有關(guān)，還與載體結(jié)構(gòu)和性能密切相關(guān)。鑒于此，本文提出構(gòu)建具有抗癌活性智能藥物傳輸體系，將具有抗腫瘤功效的小分子多酚-白藜蘆醇與高分子聚合物鍵合形成載體材料。通過調(diào)控聚合物組成及

2、結(jié)構(gòu)賦予載體材料刺激響應(yīng)行為，研究了載體組成和結(jié)構(gòu)對載藥量和包封率的影響規(guī)律，考察了載體的刺激響應(yīng)釋藥行為，探討了癌細(xì)胞對載體材料的攝取行為，為開發(fā)高性能抗腫瘤藥物輸送體系提供了一條新思路。全文的主要研究內(nèi)容及創(chuàng)新點如下:
　　(1)采用聚乙二醇修飾白藜蘆醇，制備聚乙二醇-白藜蘆醇（PEG-RES）和聚乙二醇-甘氨酸-白藜蘆醇(PEG-Glycine-RES)。PEG-RES和PEG-Glycine-RES在25℃水中的溶解度分別

3、為870mg/mL和930 mg/mL，較白藜蘆醇原料藥的溶解度（23μg/mL）有較大幅度提高。同時，聚乙二醇化白藜蘆醇的光穩(wěn)定性和酸堿穩(wěn)定性與白藜蘆醇相比也具有明顯改善。更重要的是，聚乙二醇化白藜蘆醇依舊具有抗氧化活性和顯著的抗癌活性。
　　(2)以比卡魯胺為模型藥，制備聚乙二醇化白藜蘆醇載藥納米粒。載藥后，PEG-RES和PEG-Glycine-RES平均粒徑分別為112nm和131nm，載藥量分別為10.1％和12.5％。

4、甘氨酸的引入加速了白藜蘆醇的釋放，24小時后，PEG-Glycine-RES中釋放白藜蘆醇的量為38％，PEG-RES釋放白藜蘆醇的量僅為17％。經(jīng)聚乙二醇化白藜蘆醇負(fù)載后，比卡魯胺的癌細(xì)胞抑制作用得到明顯增強。同時，HeLa和MCF-7癌細(xì)胞均對聚乙二醇化白藜蘆醇載體具有較強的細(xì)胞攝取能力。
　　(3)合成具有pH響應(yīng)的聚乙二醇-聚組氨酸，用透析法制備了聚乙二醇-甘氨酸-白藜蘆醇/聚乙二醇-聚組氨酸納米粒，以阿霉素為模型藥，進行

5、載藥性能研究。當(dāng)聚乙二醇-甘氨酸-白藜蘆醇與聚乙二醇-聚組氨酸的質(zhì)量比為1∶1時，pH響應(yīng)納米粒的平均粒徑為65 nm，阿霉素的載藥量和包封率分別可達(dá)12.0和80％。載體顯示出顯著的pH控釋響應(yīng)效果，在癌細(xì)胞內(nèi)環(huán)境(pH5.5)中，阿霉素在12小時內(nèi)釋放量即可上升到80％，遠(yuǎn)高于在正常組織(pH7.4)的藥物釋放量。除此之外，pH響應(yīng)納米粒明顯增強了阿霉素對癌細(xì)胞的抑制作用。進一步研究發(fā)現(xiàn)載體攜帶阿霉素進入細(xì)胞的主要途徑是通過巨胞飲介

6、導(dǎo)作用。
　　(4)合成靶向c(RGDfK)修飾的RGDfK-PEG-PLA-RES，并進一步制備RGDfK-PEG-PLA-RES/殼聚糖（靶向白藜蘆醇納米粒），以紫杉醇為模型藥，進行載藥性能研究。載藥后靶向白藜蘆醇納米粒的平均粒徑為202 nm，載藥量和包封率分別為12.5％和88％。紫杉醇在在癌細(xì)胞內(nèi)環(huán)境(pH5.5)條件下釋藥更快，而白藜蘆醇在高還原劑濃度下水解更完全。靶向白藜蘆醇納米粒提高了癌細(xì)胞中藥物的含量，說明靶向R

7、GDfK能夠增強細(xì)胞對藥物的攝取能力，并提高了藥物對癌細(xì)胞的細(xì)胞毒性。
　　(5)合成出白藜蘆醇接枝率分別為10％，30％和60％的聚乙烯亞胺-白藜蘆醇(PEI-RES)。三種PEI-RES的平均粒徑均約為100 nm，隨著白藜蘆醇接枝率的增加，其抗蛋白吸附能力增強。同時PEI-RES表現(xiàn)出類似聚乙烯亞胺的質(zhì)子化緩沖能力。在低接枝率下，PEI-RES的細(xì)胞毒性弱于PEI，隨著白藜蘆醇接枝率的增加，PEI-RES的細(xì)胞毒性增強。流式