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文檔簡介
1、巨噬細胞是廣泛分布于機體的一種重要的免疫細胞,主要起源于骨髓前體細胞。巨噬細胞能被外界刺激激活,被活化的巨噬細胞其吞噬能力顯著增強,能夠通過直接吞噬或者分泌炎性細胞因子(IL-6、TNF-α、IL-1β等)、NO和活性氧等抗病原介質間接殺死病原體,有效防御外源病原體對機體的侵害,是機體的第一道防線。巨噬細胞還能夠通過吞噬病原體并呈遞抗原,從而誘發(fā)機體的免疫應答來抵御外界的侵害。海藻多糖近年來被發(fā)現(xiàn)具有多種生物活性,如抗腫瘤、抗氧化、抗病
2、毒、降血脂、免疫調節(jié)等。海藻資源豐富,探究其生物活性成分,開發(fā)功能性食品從而達到高值化利用具有重要意義。
本研究通過水煮醇沉、DEAE-cellulose纖維柱層析獲得較高純度的紫菜多糖和龍須菜多糖;紫菜多糖的糖含量為81.20%,糖醛酸含量為7.35%,硫酸根含量為14.67%;龍須菜多糖的糖含量為81.19%,糖醛酸含量為8.20%,硫酸根含量為9.33%。利用巨噬細胞RAW264.7探究紫菜多糖和龍須菜多糖的生物活性。M
3、TT實驗顯示,兩種多糖都能夠有效促進RAW264.7的增殖,增強細胞活性;在5~100μg/mL濃度范圍內,紫菜多糖刺激12h,其促增殖作用隨濃度升高而升高,刺激24h,濃度在40μg/mL時細胞活力達到最高,是對照組細胞活力的2.7倍;龍須菜多糖濃度在12.5~200μg/mL范圍內能夠顯著增強RAW264.7細胞活力,但各濃度之間無顯著差異。中性紅攝取實驗顯示,紫菜多糖和龍須菜多糖能夠顯著增強巨噬細胞的吞噬能力,不同濃度(25、50
4、、100μg/mL)的紫菜多糖處理組RAW264.7吞噬能力分別是對照組的1.8、2.1、2.5倍,不同濃度(50、100、200μg/mL)的龍須菜多糖處理組RAW264.7吞噬能力分別是對照組的1.7、2.0、2.4倍。此外,紫菜多糖和龍須菜多糖都能夠有效促進RAW264.7釋放NO、TNF-α、IL-6等細胞因子;RAW264.7經不同濃度(25、50、100μg/mL)紫菜多糖刺激后,NO釋放量為34.76、49.20、53.1
5、8μmol/L,與對照組(1.722μmol/L)相比顯著上升,TNF-α含量為136.76、147.08、141.72ng/L,與對照組(109.84ng/L)相比顯著上升,IL-6的含量(147.17、160.55、155.13ng/L)與對照組(133.01ng/L)相比顯著上升;經50、100、200μg/mL龍須菜多糖刺激后,NO釋放量由對照組0.21μmol/L上升到50.31、55.13、69.66μmol/L,TNF-α
6、含量為132.20、141.27、149.93ng/L,與對照組(107.34ng/L)相比顯著上升,IL-6的含量(142.20、151.27、159.93ng/L)與對照組(127.34ng/L)相比顯著上升。實驗結果表明,紫菜多糖和龍須菜多糖促進RAW264.7釋放NO主要是通過JNK和JAK2兩條信號通路途徑。
綜上所述,從壇紫菜和龍須菜中純化的多糖能夠有效激活RAW264.7,促進其細胞的增殖,增強其吞噬能力,并調節(jié)
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