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文檔簡介
1、集美大學碩士學位論文糖基修飾改性對擬穴青蟹過敏原性質的影響姓名:阮韋偉申請學位級別:碩士專業(yè):微生物學指導教師:劉光明20120602Effectsofglycosylmodificationontheallergensfrommudcrab(Scyllaparamamosain)AbstractFoodallergyhasbeenbecomeofincreasingconcerntothefoodsafetyandpublicheal
2、thAsoneofeightmajorallergenicfoodsproposedbyFAO/WHO,theallergenicincidenceswereraisingrecentlyTropomyosin(TM)andargininekinase(AK)wereimportantallergensfromcrabTheallergenWasgenerallyglycoproteinwithacidicisoelectricpoin
3、t,itWasreportedthatglycosylationplayedallimportantroleinformationofantigenicdeterminantHowever,reportsaboutthesugarcharacteristicofTMandAKarefewTherefore,itwasimportanttodiscusstheroleofglycosylmodificationinTMandAKforfu
4、rtherstudytocraballergenInthestudy,weselectedScyllaparamamosainasmaterialFirstly,purifiedTMandAKfromcrabwereneededPASstaining,phenol—sulfuricacidand[3eliminationwereappliedtoTMandAK,andthenthetotalsugarcontentofallergens
5、fromseafoodwasdiscussedSecondlymodembiotechnologyWasusedtoanalyzetheIgEbindingactivityofTMandAKtreatedbyenzymeandchemicaldeglycosylationThirdlyTMandAKreactedwithtweducingsugartoinvestigatetheeffectofMaillardreactiononthe
6、irIgEbindingactivityanddigestibilityTMandAKwerepurifiedfromScyllaparamamosainbyisoelectricprecipitation,ammoniumsulfatefractionation,columnchromatography,etcTMandAKweredemonsgatedtobeglycoproteinsbyPASstaining,phenolsulf
7、uricacidmethod,13eliminationandmodembiotechnology,with02%and17%ofthetotalsugarcontent,respectivelyTMandAKonlycontainedOglycans,respectivelyCompared謝thTMandAKfromcrabandshrimp,thetotalsugarcontentofTMfromshellfishandoctop
8、usWashigher,andthecarbohydratecontentofAKfromshrimpWaslowerthanthatofcrabWhenglycanswereremovedbyenzymaticdeglycosylation,itWasfoundthatnoobviouslyreduceinmolecularweightofTMandAKFurtherstudywestern—blottingandinhibition
9、ELISAusingserafromallergenicpatientsshowednoeliminationofIgEbindingactivityofbothallergensHowever,periodatetreatmentcouldresultingreatreductionofIgEbindingactivityofTMandAKDuringtheglycosylationbyMaillardreactionitWasfou
10、ndthattherateofglycosylationofTMandAKwitllriboseWasmorequiklythanwithglucoseTheglycosylationofTMWasmorerapidlythanthatofAKComparedtodrymethod,MaillardreactioninwetmethodwouldslowdowntherateofglycosylationTheglycosylatedp
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