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1、本研究以脫脂牛乳為底物,在β-半乳糖苷酶Biolactase L的催化下,優(yōu)化出制備富含低聚半乳糖(Galacto-oligosaccharides, GOS)牛乳的最佳工藝參數(shù),對(duì)該酶促反應(yīng)進(jìn)行了動(dòng)力學(xué)分析,并對(duì)活性乳進(jìn)行理化與感官特性分析。
以GOS轉(zhuǎn)化率為標(biāo)準(zhǔn),采用高效陰離子交換色譜-脈沖安培檢測(cè)法(HPAEC-PAD),通過單因素分析,可確定最佳工藝參數(shù)。擬設(shè)定酶促反應(yīng)溫度范圍為30℃-60℃,酶添加量為0.01%-0
2、.03%(w/w),反應(yīng)時(shí)間為20min-60min。結(jié)果表明,在40℃下添加0.015%乳糖酶反應(yīng)40min的牛乳GOS轉(zhuǎn)化率最高,達(dá)到17.0%。通過正交試驗(yàn)表明,三個(gè)工藝參數(shù)間的交互作用對(duì)GOS轉(zhuǎn)化率沒有顯著性影響。采用oNPG法可測(cè)得UHT前活性牛乳中的乳糖酶活力為4200U/g,UHT后乳糖酶活與陰性對(duì)照無顯著性差異。Biolactase L對(duì)牛乳中乳糖的催化反應(yīng)動(dòng)力學(xué)分析表明,最大反應(yīng)速率Vmax為0.267μmol/min
3、,米氏常數(shù)Km為1.45 mmol/L。
活性乳的理化特性分析表明,乳中含乳脂肪0.10%,蛋白質(zhì)3.26%,非脂乳固體8.68%,乳糖4.42%,含量皆符合滅菌乳國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)(GB5408.2—1999)。UHT滅菌后GOS牛乳的酸度為15.3°T,微生物檢測(cè)顯示活性乳達(dá)到商業(yè)無菌狀態(tài)?;钚匀槌饰ⅫS色、外觀均一,與原料牛乳的明度、紅綠色差有顯著性差異(p<0.05),在黃藍(lán)顏色及總色差上有極顯著差異(p<0.01)?;A(chǔ)感官評(píng)定
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