海蜇糖蛋白及其糖肽免疫活性研究.pdf

1、海蜇（Rhopilema esculehtum Kishinouye）具有較高的經(jīng)濟(jì)、營養(yǎng)和藥用價值，是一種醫(yī)食同源性海洋生物。糖蛋白及糖肽作為廣泛存在于生物體內(nèi)的天然活性物質(zhì)，除具有細(xì)胞間識別調(diào)控作用外，還有抗腫瘤、提高免疫力等多種生物活性。本課題著重對海蜇糖蛋白及其糖肽免疫活性方面進(jìn)行研究，以期為海蜇資源的深度利用提供一定理論依據(jù)，為免疫型新特藥物及功能食品的開發(fā)提供一定的參考。研究內(nèi)容及結(jié)果如下：
　　1.海蜇糖蛋白提取純化

2、：通過稀鹽溶液提取、乙醇分級沉淀、膜層析等提取純化方法，獲得組分均一的糖蛋白。結(jié)果顯示，糖蛋白的得率為1.8％，其中總蛋白含量為87.74%，總糖含量為11.87%。
　　2.糖肽制備工藝優(yōu)化：通過單因素試驗及響應(yīng)面優(yōu)化試驗，研究底物濃度、溫度、pH值對酶解過程中水解度的影響，確定酶解海蜇糖蛋白制備糖肽的最佳工藝。結(jié)果顯示，綜合單因素試驗和響應(yīng)面優(yōu)化試驗確定酶解海蜇糖蛋白制備糖肽的最佳工藝參數(shù)為：以復(fù)合蛋白酶作為制備糖肽的優(yōu)良酶源

3、，底物濃度2.18mg/mL、pH7.3、溫度52℃，此時的水解度為28%。
　　3.糖蛋白及其糖肽體外免疫活性的影響：通過小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)化試驗，比較海蜇糖蛋白及其糖肽在不同培養(yǎng)時間、濃度條件下對小鼠體外免疫活性的影響。結(jié)果顯示，不同培養(yǎng)時間、濃度的海蜇糖蛋白及糖肽均能不同程度的提高小鼠脾淋巴細(xì)胞的增殖和轉(zhuǎn)化能力，且表現(xiàn)出一定的劑量關(guān)系。糖肽Ⅰ組在提高小鼠脾淋巴細(xì)胞的增殖和轉(zhuǎn)化能力方面顯著優(yōu)于其它幾個組分。
　　4.

4、糖蛋白及其糖肽體內(nèi)免疫活性的影響：通過小鼠免疫器官指數(shù)試驗、小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)試驗、小鼠巨噬細(xì)胞吞噬能力試驗、小鼠血清溶血素試驗和小鼠抗體生成細(xì)胞數(shù)試驗，觀察海蜇糖蛋白及其糖肽對小鼠體內(nèi)免疫功能的影響。結(jié)果顯示，不同濃度的海蜇糖蛋白及其糖肽均能不同程度地提高小鼠免疫活性，且表現(xiàn)出一定的劑量效應(yīng)關(guān)系。與海蜇糖蛋白相比海蜇糖肽對免疫低下小鼠具有較強的免疫調(diào)節(jié)作用，且糖肽Ⅰ組對小鼠特異性免疫調(diào)節(jié)作用明顯優(yōu)于其它組分，從而篩選出免疫活性最強組分