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文檔簡介
1、海蜇(Rhopilema esculehtum)是一種經(jīng)濟價值、營養(yǎng)價值和藥用價值均極高的醫(yī)食同源性大型水母。糖蛋白是一種普遍存在于生物體內的糖與蛋白質的復合物,具有細胞間識別調控作用,還具有多種生物活性,如抗腫瘤活性、調節(jié)免疫活性等。細胞因子是一種可在細胞間傳遞信息的小分子糖蛋白或蛋白,是機體免疫系統(tǒng)重要的的組成部分。本課題著重對海蜇糖蛋白對細胞因子 mRNA表達量的影響進行研究,對海蜇糖蛋白的免疫活性進行分子水平的分析,旨在為我國海
2、蜇資源的開發(fā)利用提供一定的理論依據(jù),為新型免疫類藥物及保健食品的開發(fā)提供一定的理論參考。研究內容及結果如下:
1.體外實驗:處死小鼠,無菌取脾臟,分離得到淋巴細胞,分5組(正常對照組、模型對照組、海蜇糖蛋白高、中、低劑量組),給藥,置于細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。提取各組細胞總 RNA,逆轉錄為 cDNA,采用熒光定量 PCR技術檢測各組Th1,Th2和Th17類細胞因子mRNA表達量,實驗數(shù)據(jù)采用相對定量法進行處理。實驗結果為,海蜇糖
3、蛋白可顯著提高 Th1類細胞因子 mRNA表達量,且高劑量組表現(xiàn)為與正常對照組無顯著差異;海蜇糖蛋白可顯著降低 Th2類和Th17類細胞因子 mRNA表達量,且中劑量組和高劑量組均與正常對照組無顯著差異。
2.體內實驗:小鼠隨機分6組,即空白對照組、陽性對照組、模型對照組、海蜇糖蛋白高、中、低劑量組。建造模型,灌胃給藥21d后,處死小鼠,無菌取脾臟,分離得到淋巴細胞,提取細胞總 RNA,逆轉錄為 cDNA,檢測各組Th1,Th
4、17和 Th2類細胞因子 mRNA表達量,實驗數(shù)據(jù)采用相對定量法進行處理。實驗結果為,海蜇糖蛋白可顯著上調 Th1類細胞因子 mRNA表達量,且糖蛋白高劑量組表現(xiàn)為與空白對照組無顯著性差異;海蜇糖蛋白可顯著下調 Th2類和Th17類細胞因子mRNA表達量,且糖蛋白高劑量組與空白對照組無顯著差異。
3.體內外實驗結果顯示,海蜇糖蛋白通過細胞培養(yǎng)給藥和體內灌胃給藥,對細胞因子 mRNA表達量的影響趨勢是一致的。推測海蜇糖蛋白可能是
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