海蜇糖蛋白對(duì)細(xì)胞因子mRNA表達(dá)的影響研究.pdf

1、海蜇（Rhopilema esculehtum）是一種經(jīng)濟(jì)價(jià)值、營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和藥用價(jià)值均極高的醫(yī)食同源性大型水母。糖蛋白是一種普遍存在于生物體內(nèi)的糖與蛋白質(zhì)的復(fù)合物，具有細(xì)胞間識(shí)別調(diào)控作用，還具有多種生物活性，如抗腫瘤活性、調(diào)節(jié)免疫活性等。細(xì)胞因子是一種可在細(xì)胞間傳遞信息的小分子糖蛋白或蛋白，是機(jī)體免疫系統(tǒng)重要的的組成部分。本課題著重對(duì)海蜇糖蛋白對(duì)細(xì)胞因子 mRNA表達(dá)量的影響進(jìn)行研究，對(duì)海蜇糖蛋白的免疫活性進(jìn)行分子水平的分析，旨在為我國(guó)海

2、蜇資源的開(kāi)發(fā)利用提供一定的理論依據(jù)，為新型免疫類(lèi)藥物及保健食品的開(kāi)發(fā)提供一定的理論參考。研究?jī)?nèi)容及結(jié)果如下：
　　1.體外實(shí)驗(yàn)：處死小鼠，無(wú)菌取脾臟，分離得到淋巴細(xì)胞，分5組（正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、海蜇糖蛋白高、中、低劑量組），給藥，置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。提取各組細(xì)胞總 RNA，逆轉(zhuǎn)錄為 cDNA，采用熒光定量 PCR技術(shù)檢測(cè)各組Th1，Th2和Th17類(lèi)細(xì)胞因子mRNA表達(dá)量，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用相對(duì)定量法進(jìn)行處理。實(shí)驗(yàn)結(jié)果為，海蜇糖

3、蛋白可顯著提高 Th1類(lèi)細(xì)胞因子 mRNA表達(dá)量，且高劑量組表現(xiàn)為與正常對(duì)照組無(wú)顯著差異；海蜇糖蛋白可顯著降低 Th2類(lèi)和Th17類(lèi)細(xì)胞因子 mRNA表達(dá)量，且中劑量組和高劑量組均與正常對(duì)照組無(wú)顯著差異。
　　2.體內(nèi)實(shí)驗(yàn)：小鼠隨機(jī)分6組，即空白對(duì)照組、陽(yáng)性對(duì)照組、模型對(duì)照組、海蜇糖蛋白高、中、低劑量組。建造模型，灌胃給藥21d后，處死小鼠，無(wú)菌取脾臟，分離得到淋巴細(xì)胞，提取細(xì)胞總 RNA，逆轉(zhuǎn)錄為 cDNA，檢測(cè)各組Th1，Th

4、17和 Th2類(lèi)細(xì)胞因子 mRNA表達(dá)量，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用相對(duì)定量法進(jìn)行處理。實(shí)驗(yàn)結(jié)果為，海蜇糖蛋白可顯著上調(diào) Th1類(lèi)細(xì)胞因子 mRNA表達(dá)量，且糖蛋白高劑量組表現(xiàn)為與空白對(duì)照組無(wú)顯著性差異；海蜇糖蛋白可顯著下調(diào) Th2類(lèi)和Th17類(lèi)細(xì)胞因子mRNA表達(dá)量，且糖蛋白高劑量組與空白對(duì)照組無(wú)顯著差異。
　　3.體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，海蜇糖蛋白通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)給藥和體內(nèi)灌胃給藥，對(duì)細(xì)胞因子 mRNA表達(dá)量的影響趨勢(shì)是一致的。推測(cè)海蜇糖蛋白可能是