HSP70表達(dá)抑制對LPS所致細(xì)胞因子表達(dá)的影響及其機(jī)制研究.pdf

1、嚴(yán)重創(chuàng)傷、燒傷、敗血癥（特別是革蘭氏陰性菌敗血癥）及各種類型的休克常導(dǎo)致全身炎癥反應(yīng)綜合征（systemic inflammatory response syndrome，SIRS）發(fā)生。SIRS是臨床各科十分常見、平時(shí)及戰(zhàn)時(shí)導(dǎo)致死亡的危重病癥。雖然SIRS的發(fā)生機(jī)制迄今尚未完全闡明，但是LPS所致炎癥介質(zhì)的表達(dá)和細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的活化，在其發(fā)病學(xué)中的重要作用已受到廣泛關(guān)注。 本研究應(yīng)用RNA干擾技術(shù)，抑制RAW264.7小鼠

2、巨噬細(xì)胞的HSP70基因表達(dá)。采用RT-PCR檢測發(fā)現(xiàn)，大腸桿菌脂多糖（LPS）可誘導(dǎo)轉(zhuǎn)空載體的RAW264.7小鼠巨噬細(xì)胞（NEO）產(chǎn)生大量IL-1β和IL-6等細(xì)胞因子。而用過表達(dá)HSP70的RAW264.7細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)HSP70抑制了LPS誘導(dǎo)的細(xì)胞因子表達(dá)。當(dāng)抑制HSP70基因的表達(dá)后，再進(jìn)行LPS刺激，則細(xì)胞因子表達(dá)增多，說明抑制HSP70的表達(dá)可促進(jìn)LPS誘導(dǎo)的細(xì)胞因子表達(dá)。 由于NF-κB/IκB信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路

3、的活化在LPS所致炎癥反應(yīng)中發(fā)揮了重要作用，我們進(jìn)一步分析了HSP70表達(dá)抑制對LPS所致NF-κB信號通路活化的影響。通過Western blot等技術(shù)檢測NF-κB（p65）的核移位，我們發(fā)現(xiàn)抑制HSP70表達(dá)后，HSP70對NF-κB（p65）核移位（LPS刺激60 min）及LPS刺激20 min所致的IκB降解的抑制作用被解除。 由于IκBα的降解涉及IκBα的磷酸化，而IκBα的磷酸化是由IκB的激酶IKK以及相應(yīng)的