骨髓間充質(zhì)干細胞對退變椎間盤細胞因子表達的影響.pdf

1、目的：探討纖維環(huán)穿刺法誘導椎間盤退變建立動物模型的可行性和；BMSCs移植至退變動物模型后，觀察移植后退變椎間盤中細胞因子表達的變化及其規(guī)律。
　　方法：（1）取32只新西蘭大白兔行暴露椎間盤，其中24只大白兔經(jīng)右側(cè)腹膜外入路準確暴露L3/4、L4/5和L5/6，血管鉗夾持16G穿刺針準確刺入L3/4、L4/5和L5/6椎間盤的纖維環(huán)，造成纖維環(huán)破裂，誘導退變。并隨機分成空白組（B組）、干預組（C組）和實驗組（D組）；剩下8只暴露

2、椎間盤，但不穿刺，作為正常組（A組）；于術(shù)后4周，在每組中隨機抽取2只實驗動物行MRI，觀察實驗動物椎間盤退變情況；（2）將培養(yǎng)擴增的P3代BMSCs移植入已退變椎間盤的動物模型D組中，C組植入等量的藻酸鹽，A、B組不作任何處理；（3）移植后2、4、8、12周，每次每組取2只實驗動物椎間盤，并利用RT-PCR檢測椎間盤中MMP-1、MMP-2、MMP-3、IL-1、TNF-α和TGF-β的表達量，Weston Blot檢測椎間盤中PG、

3、Ⅱ型膠原的含量變化；（4）SPSS12.0分析上述各數(shù)據(jù)。
　　結(jié)果：（1）通過MRI、WB可以證明纖維環(huán)穿刺法可以有效誘導動物椎間盤退變；（2）RT-PCR，WB檢測結(jié)果經(jīng)SPSS12.0統(tǒng)計學分析：退變椎間盤中MMP-1、MMP-2、MMP-3、IL-1和TNF-α表達量較正常椎間盤高（P＜0.05）；BMSCs移植入退變椎間盤后MMP-1、MMP-2、MMP-3、IL-1和TNF-α的表達量減少（P＜0.05），并隨移植時間

4、延長，表達量呈遞減趨勢；退變椎間盤中TGF-β表達量較正常椎間盤低（P＜0.05）；BMSCs的移植入退變椎間盤后TGF-β的表達量增加（P＜0.05），并隨移植時間延長，表達量呈遞增趨勢；PG和Ⅱ型膠原在退變椎間盤的表達小于正常椎間盤，移植入BMSCs后，兩者表達量增加，并隨時間的延長，增加越明顯。
　　結(jié)論：（1）纖維環(huán)穿刺法可以有效誘導兔椎間盤的緩慢退變，為研究椎間盤的退行性變提供有效的動物模型；（2）退變椎間盤中MMP-1