芹菜素對(duì)小鼠T細(xì)胞增殖及細(xì)胞因子基因表達(dá)的影響.pdf

1、目的：研究痹腫消湯（Bizhongxiao decoction，BZXD）有效成分之一芹菜素（Apigenin，AP）對(duì)小鼠體外活化T細(xì)胞活化、增殖及細(xì)胞因子基因表達(dá)的影響，探討其在免疫抑制及治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（Rheumatoid arthritis，RA）方面的作用機(jī)制。 方法：無(wú)菌制備小鼠脾臟T淋巴細(xì)胞，加入不同濃度的AP（0、20、40、80、120、160μmol/L）并用佛波醇酯（Phorbol-12-myrista

2、tel3-acetate，PMA）和離子霉素（Ionomycin，Ion）刺激T細(xì)胞活化、增殖；48 h后用MTT法檢測(cè)T細(xì)胞增殖情況；6h后用RT-PCR法檢測(cè)T細(xì)胞白細(xì)胞介素-2（Interleukin-2，IL-2）mRNA、干擾素-γ（Interferon gamma，IFN-γ）mRNA及IL-4mRNA的表達(dá)情況。 結(jié)果： 1.48h后，PMA+Ion組細(xì)胞MTT吸光度（Absorbance，A值）明顯高于未

3、刺激組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。40、80、120、160μmol/L濃度的AP組各A值均較PMA+Ion組減弱，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。AP濃度（0、20、40、80、120、160μmol/L）與A值呈顯著負(fù)相關(guān)（r=0.855，P<0.01）。 2.6h后，PMA+Ion組細(xì)胞IL-2mRNA，IFN-γmRNA及IL-4mRNA的表達(dá)均較空白對(duì)照組增高，差異具有顯著性（P<0.01）。40、80、

4、120μmol/L濃度的AP組上述各細(xì)胞因子的基因表達(dá)較PMA+Ion組明顯降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），且呈不同程度的抑制。20μmol/L濃度的AP組的IFN-γmRNA及IL-4mRNA的表達(dá)較PMA+Ion組表達(dá)明顯減弱，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），但在IL-2mRNA的表達(dá)上無(wú)明顯差異（P>0.05）。AP的實(shí)驗(yàn)濃度與上述各細(xì)胞因子的表達(dá)均呈顯著負(fù)相關(guān)（IL-2mRNA： r=-0.965，P<0.01；I

5、FN-γmRNA： r=-0.944，P<0.01； IL-4mRNA： r=-0.964，P<0.01）。各實(shí)驗(yàn)濃度AP對(duì)PMA+Ion誘導(dǎo)活化的小鼠T淋巴細(xì)胞IFN-γmRNA表達(dá)的抑制作用強(qiáng)于IL-4mRNA的抑制（P<0.01）。 結(jié)論： 1.AP能明顯抑制對(duì)PMA+Ion活化誘導(dǎo)的小鼠T淋巴細(xì)胞增殖，提示AP具有免疫抑制作用。 2.AP對(duì)PMA+Ion活化誘導(dǎo)的小鼠T淋巴細(xì)胞IL-2mRNA、IFN-γ