芒果苷對哮喘小鼠CD4+T細(xì)胞亞群及其細(xì)胞因子影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：運(yùn)用卵白蛋白（OVA）致敏和激發(fā)的方法建立過敏性哮喘小鼠模型，觀察芒果葉提取物——芒果苷治療過敏性哮喘的藥效作用，并進(jìn)一步探討芒果苷對哮喘小鼠CD+4 T細(xì)胞亞群及其細(xì)胞因子的影響。
　　方法：將60只4~5周SPF級BALB/c雌性小鼠隨機(jī)分為6組：空白對照組、模型對照組、地塞米松陽性對照組（1.25mg·kg-1）、芒果苷高劑量組（400mg·kg-1）、芒果苷中劑量組（200mg·kg-1）和芒果苷低劑量組（100mg

2、·kg-1），每組10只。采用OVA致敏和激發(fā)構(gòu)建小鼠哮喘模型。
　　1芒果苷治療過敏性哮喘的藥效學(xué)研究：觀察激發(fā)時各組小鼠的哮喘發(fā)作表現(xiàn)；細(xì)胞涂片進(jìn)行外周血中白細(xì)胞分類計數(shù)；HE染色觀察肺組織病理切片炎癥細(xì)胞浸潤情況，確認(rèn)成功的復(fù)制哮喘動物模型。
　　2芒果苷治療過敏性哮喘的免疫機(jī)制研究：采用蛋白芯片技術(shù)檢測小鼠血清中相關(guān)炎癥細(xì)胞因子的蛋白表達(dá)水平；采用利用 FACS技術(shù)檢測哮喘小鼠T細(xì)胞中CD4+IFN-γ+細(xì)胞、 CD

3、4+IL-4+細(xì)胞、CD4+IL-17+細(xì)胞、CD4+Foxp3+細(xì)胞占CD4+T細(xì)胞的比例的變化，以進(jìn)一步明確芒果苷對Th1、Th2、Thl7和Treg細(xì)胞分化的調(diào)節(jié)作用。
　　結(jié)果：1芒果苷治療過敏性哮喘的藥效學(xué)研究：與模型組比較，各芒果苷治療組小鼠哮喘發(fā)作表現(xiàn)如嗆咳、呼吸急促、躁動不安、腹肌收縮、紫紺等癥狀明顯減輕（P<0.05~0.01）；芒果苷各劑量組均能明顯減少外周血中嗜酸性粒細(xì)胞（EOS）、嗜中性粒細(xì)胞（NEU）比例

4、（P<0.01），芒果苷中、低劑量組能減少外周血中白細(xì)胞總數(shù)（P<0.01）；芒果苷各劑量組均可不同程度的改善肺組織的病理學(xué)改變，減輕氣道炎癥（P<0.05~0.01）。
　　2芒果苷治療過敏性哮喘的免疫分子機(jī)制研究
　　2.1芒果苷對哮喘小鼠血清中相關(guān)細(xì)胞因子蛋白水平影響：蛋白芯片結(jié)果顯示：與模型組相比，芒果苷各劑量組均可顯著提高小鼠血清中IFN-γ、IL-10的表達(dá)水平（P<0.05~0.01）；芒果苷高劑量組可明顯降低

5、IL-4、IL-17的表達(dá)水平（P<0.05~0.01）；芒果苷中劑量組可明顯降低 IL-17的表達(dá)水平（P<0.01），對 IL-4的表達(dá)有降低趨勢（P>0.05）；芒果苷低劑量組對IL-17有降低趨勢（P>0.05）。
　　2.2芒果苷對CD+4 T細(xì)胞亞群及細(xì)胞因子分化和功能的影響：流式細(xì)胞儀檢測結(jié)果顯示：與模型組相比，芒果苷高劑量組可顯著降低小鼠脾細(xì)胞中CD4+IL-4+、CD4+IL-l7+細(xì)胞占CD4+細(xì)胞的比例（P<

6、0.05）；芒果苷中劑量組對CD4+IL-4+、CD4+IL-l7+細(xì)胞占CD4+細(xì)胞的比例有降低的趨勢；芒果苷高、中劑量組對 CD4+IFN-γ+細(xì)胞/ CD4+細(xì)胞有增加的趨勢（P>0.05）；芒果苷低劑量組 CD4+IFN-γ+細(xì)胞/ CD4+細(xì)胞有所增加（P<0.05），對CD4+Foxp3+細(xì)胞/CD4+細(xì)胞有增加趨勢（P>0.05）。
　　結(jié)論：1芒果苷可明顯減輕激發(fā)時哮喘小鼠的發(fā)作表現(xiàn)，改善肺組織病理學(xué)改變，減輕氣道

7、炎癥，進(jìn)一步證實(shí)了芒果苷具有平喘的藥效作用,并成功復(fù)制哮喘模型。
　　2芒果苷治療過敏性哮喘的免疫機(jī)制可能是：①調(diào)節(jié)Th1、Th2、Treg和Th17細(xì)胞的細(xì)胞因子的表達(dá)：即可上調(diào)Th1型細(xì)胞因子IFN-γ和Treg型細(xì)胞因子IL-10的表達(dá)，抑制Th2型細(xì)胞因子IL-4和Th17型細(xì)胞因子IL-17的表達(dá)；②調(diào)節(jié)Th1、Th2、Treg和Th17細(xì)胞的分化：即上調(diào)Th1型細(xì)胞占CD4+細(xì)胞比例和降低Th17型細(xì)胞、Th2型細(xì)胞占