肺癌射頻消融后CD4+T細胞亞群變化及其臨床意義的初步探討.pdf

1、汕頭大學醫(yī)學院碩士學位論文I中文摘要目的初步研究正常人群外周血CD4T細胞亞群Th1、Th2、Th17、Treg細胞的水平和肺癌射頻消融（Radiofrequencyablation，RFA）治療后CD4T細胞亞群的變化，通過對照分析初步探討CD4T細胞亞群變化的臨床意義。材料與方法選擇30例健康人作為正常對照組，根據(jù)肺癌患者在各年齡段及性別分布比例確定對照組各年齡段的男女例數(shù)，于清晨空腹抽取外周靜脈血進行流式細胞術檢測。6例經皮穿刺病

2、理活檢證實為肺癌的患者，采用氣管插管下靜脈麻醉，在CT引導下行RFA治療，分別于治療前及治療后半月、1月、2月、3月清晨抽取空腹外周靜脈血進行流式細胞術檢測。Th1、Th2、Th17細胞的代表因子分別是IFNγ、IL4、IL17，采用全血胞內染色法檢測細胞因子間接分析Th1、Th2、Th17細胞水平，用佛波酯(PMA)、離子霉素(Ionomycin)刺激細胞因子表達，并用蛋白轉運抑制劑（BrefeldinA，BFA）阻斷其分泌到胞外，以

3、熒光素偶聯(lián)的單克隆抗體CD3—PECy5、CD8—APCCy7、IFNγ—APC、IL17—FITC及IL4—PE對細胞表面抗原及胞內細胞因子直接標記，染色后用BDFACSCanto流式細胞儀測定各項指標，以FACSDiva軟件分析Th1、Th2、Th17細胞占CD4T細胞的百分率。Treg細胞的特征表型分子是CD3CD4CD25foxp3，轉錄因子foxp3是位于細胞內部的特征性表型分子，采用全血胞內染色法檢測胞內抗原分子以分析Tre

4、g細胞水平，以熒光素偶聯(lián)的單克隆抗體CD3—APC、CD4—PECy5、CD25—FITC及foxp3—PE對細胞表面及胞內抗原分子直接標記，染色后用BDFACSCanto流式細胞儀測定各項指標，以FACSDiva軟件分析Treg細胞占CD4T細胞的百分率。正常健康人檢測結果采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計描述分析；6例肺癌RFA治療術前、術后CD4T細胞亞群水平直接采用平均數(shù)進行趨勢分析。結果正常人群外周血Th1、Th2、Th17