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1、本文利用添加變形鏈球菌(Streptococcus mutans)的雙層平板,從土壤中篩選出一株產(chǎn)溶菌酶能力較高的鏈霉菌(Streptomyces sp.)G4,通對(duì)對(duì)它的形態(tài)特征,培養(yǎng)特征和生理生化特征進(jìn)行觀察并結(jié)合細(xì)胞壁成分和16SrDNA序列分析,該菌株鑒定為球孢鏈霉菌(Streptomyces globisporus)。
對(duì)球孢鏈霉菌G4進(jìn)行紫外誘變和EMS誘變復(fù)合處理,并結(jié)合抑菌圈大小定向篩選,得到一株產(chǎn)變?nèi)芫?/p>
2、能力明顯提高的菌株定名為球孢鏈霉菌G4-3,酶活較出發(fā)菌株提高了1.1倍,產(chǎn)酶周期縮短了1天,傳代5次,仍保留90%酶活。
通過單因子試驗(yàn)和正交試驗(yàn),得到最適發(fā)酵培養(yǎng)基組成為:3%蔗糖,1.25%大豆蛋白胨和0.2%牛肉膏;無機(jī)鹽的最適濃度為:0.6%NaCl、0.05%K2HPO4、0.1%NaH2PO4和0.01%CaCl2;最適培養(yǎng)條件的優(yōu)化研究發(fā)現(xiàn),培養(yǎng)時(shí)間對(duì)菌種產(chǎn)變?nèi)芫赜绊懽畲蟆Q芯孔內(nèi)芫卮置敢旱幕拘再|(zhì)得出
3、,變?nèi)芫氐淖钸m作用溫度和最適 pH分別是55℃和6.5,在pH4.0~10之間變?nèi)芫乇容^穩(wěn)定性;溶菌活性對(duì)離子強(qiáng)度的變化比較敏感。多數(shù)金屬離子會(huì)抑制變?nèi)芫氐幕钚裕渲蠪e2+、Cu2+、Zn2+、Pb2+幾乎可以使其完全失活;各種螯合劑、碘乙酸、非離子型表面活性劑SDS等對(duì)變?nèi)芫赜幸种谱饔?,而離子型表面活性劑TritonX-100,Tween80等對(duì)變?nèi)芫赜屑せ钭饔?;通過比較不同細(xì)菌、酵母菌的作用效果,變?nèi)芫乇嚷亚迦芫傅娜?/p>
4、菌譜廣泛,不僅對(duì)大部分革蘭氏陽(yáng)性菌有較強(qiáng)的溶解活性,而且對(duì)部分革蘭氏陰性菌也有作用,特別是對(duì)變形鏈球菌的表現(xiàn)出高活性。
對(duì)變?nèi)芫卮置敢哼M(jìn)行純化,得到兩種電泳純的組分A1和A2,二者的分子量分別是14795和23780,等電點(diǎn)分別是9.3和9.8。
最后,對(duì)變?nèi)芫卦谘栏嘀械膽?yīng)用做了可行性分析和初步試驗(yàn)研究,發(fā)現(xiàn)牙膏中所含的離子型表面活性劑、增稠劑及粘合劑對(duì)變?nèi)芫匕l(fā)揮功能有抑制作用,但通過向其中加入非離子表
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