降解棉酚芽孢桿菌菌株的篩選、發(fā)酵工藝優(yōu)化及其應(yīng)用效果.pdf

1、棉籽經(jīng)壓榨榨油處理后稱為棉籽餅粕,棉籽餅粕是一種優(yōu)質(zhì)的植物性蛋白飼料,可以作為理想的蛋白質(zhì)飼料。在粗飼料不足的中國,可在一定程度上彌補(bǔ)蛋白飼料資源不足。但是,由于棉籽餅粕中含有游離棉酚這一有毒物質(zhì),如果未經(jīng)脫毒長期飼喂畜禽,則很易引起中毒甚至死亡,給養(yǎng)殖戶造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。因此對棉籽餅粕進(jìn)行脫毒處理,從而更高效、更安全的利用棉副產(chǎn)品對于畜牧養(yǎng)殖業(yè)來說意義重大。
　　 生物發(fā)酵法被普遍認(rèn)為是當(dāng)前最安全、脫毒效果好、生產(chǎn)成本低的脫

2、毒方法。因為微生物固態(tài)發(fā)酵技術(shù)脫毒,具有脫毒率高、發(fā)酵時間短、投資小、設(shè)備和工藝簡單、其工藝沒有廢水污染問題及成本低等優(yōu)點(diǎn),尤其是發(fā)酵過程能增加微生物代謝活性物質(zhì),并使纖維素分解轉(zhuǎn)化成有價值的菌體蛋白,同時改善營養(yǎng)及適口性,這些特點(diǎn)是其他方法所不能比擬的。因此,微生物發(fā)酵脫毒法具有較大的發(fā)展?jié)摿?開發(fā)利用前景廣闊。
　　 以棉酚為唯一碳源,從棉田土壤中分離篩選對棉酚具有降解作用的菌株,得到具有較高降解活性的菌株M-4,其對棉酚降

3、解率達(dá)到94.74％,對該菌株進(jìn)行了菌落、菌體、芽孢形態(tài)觀察,生理生化鑒定和16SrDNA系統(tǒng)發(fā)育樹的構(gòu)建,鑒定為枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)。
　　 為了提高棉酚降解菌發(fā)酵液菌體濃度,對M-4菌株的發(fā)酵條件進(jìn)行了優(yōu)化,通過單因素試驗和正交試驗發(fā)現(xiàn)蔗糖為最佳碳源,蛋白胨為最佳氮源,MgSO4-7H2O為最佳無機(jī)鹽,確定M-4的最佳發(fā)酵條件為:蔗糖5.0g,蛋白胨10.0g,MnSO4·H2O1.0g,MgSO

4、4·7H2O0.5g,NaH2PO4·H2O0.5g,CaC1·2H2O0.1g,K2HPO40.5g,FeC130.2g,初始pH8.0,三角瓶裝液量為120mL/250mL,接種量10%,搖瓶轉(zhuǎn)速220r/min,發(fā)酵溫度30℃。培養(yǎng)條件優(yōu)化后菌體濃度顯著提高:而芽孢率在95%以上,為該菌的進(jìn)一步研究與應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)。
　　 對接菌并發(fā)酵后的棉籽餅進(jìn)行有關(guān)營養(yǎng)成分的測定,意在得出菌株對棉籽餅營養(yǎng)成分的改變,從而更好的了解棉籽