菜籽餅固態(tài)發(fā)酵菌株篩選及其發(fā)酵產(chǎn)品在豬日糧中的應(yīng)用.pdf

1、微生物發(fā)酵可提高飼料的利用效率，是目前改善低質(zhì)蛋白質(zhì)飼用品質(zhì)的有效方法之一。目前有關(guān)低質(zhì)蛋白質(zhì)飼料—菜籽粕的飼用品質(zhì)改良研究較多，而有關(guān)菜籽餅的飼用品質(zhì)改良研究較少。因此，本研究通過篩選高效硫苷降解菌株，對(duì)菜籽餅進(jìn)行飼用品質(zhì)的發(fā)酵改良，進(jìn)而通過代謝試驗(yàn)和飼養(yǎng)試驗(yàn)探討該菌種發(fā)酵菜籽餅飼喂豬的營養(yǎng)價(jià)值，以及在豬日糧中的最適添加量。
　　1.硫苷高效降解菌株的篩選、鑒定和培養(yǎng)條件優(yōu)化。本研究以菜籽餅廠表層（1-3cm）和深層（3-6cm

2、）土壤為分離源，利用牛肉膏蛋白胨和MRS培養(yǎng)基分離和純化菌株，分別通過好氧和厭氧篩選得到菌株Y4和R1，再經(jīng)16S rRNA基因序列分析確定菌株的分類地位。采用單因素和正交試驗(yàn)優(yōu)化菌株Y4和R1的培養(yǎng)基碳氮源和培養(yǎng)條件。結(jié)果顯示，Y4和 R1分別與蠟樣芽孢桿菌(Bacillus cereus)和植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)親緣關(guān)系最近。菌株Y4和R1最優(yōu)碳源為玉米粉，添加量均為10g/L；最優(yōu)氮源為發(fā)酵芝

3、麻粕，添加量均為15g/L。菌株Y4最優(yōu)培養(yǎng)條件為初始pH值為7.0，培養(yǎng)溫度為37℃，培養(yǎng)時(shí)間為24 h，震蕩頻率為150r/min。菌株R1最優(yōu)培養(yǎng)條件為初始pH值為6.5，培養(yǎng)溫度為35℃，培養(yǎng)時(shí)間為32 h。
　　2.菜籽餅發(fā)酵條件優(yōu)化。本研究采用單因素和正交試驗(yàn)優(yōu)化菌株Y4和R1固態(tài)好氧發(fā)酵條件：接種量、發(fā)酵溫度、發(fā)酵時(shí)間、料水比（w/v）和麩皮添加量。結(jié)果顯示，混菌發(fā)酵最優(yōu)組合為Y4接種量為10％，R1接種量為9%，料

4、水比（w/v）為1：1，麩皮與菜籽餅質(zhì)量比為1：10（以干物質(zhì)計(jì)），發(fā)酵溫度為30℃，發(fā)酵時(shí)間為72 h。本研究混菌發(fā)酵效果優(yōu)于單菌發(fā)酵，驗(yàn)證試驗(yàn)測得硫苷、異硫氰酸酯（ITC）和噁唑烷硫酮（OZT）的降解率分別為67.26%、60.38%和53.24%，粗蛋白和小肽含量提高了2.74和2.4個(gè)百分點(diǎn)。Y4和R1混合固態(tài)發(fā)酵菜籽餅?zāi)軌蛴行Ы到饬蜍盏瓤範(fàn)I養(yǎng)因子，可大大改善菜籽餅的飼用品質(zhì)。
　　3.發(fā)酵菜籽餅營養(yǎng)價(jià)值評(píng)定。選擇3頭健康

5、回腸末端安裝“T”型瘺管的雜交閹公豬(杜×長×大，75±1.34 kg)，飼喂玉米淀粉—蛋白半純合日糧，分別以菜籽餅、發(fā)酵菜籽餅和酪蛋白作為唯一蛋白源，酪蛋白用于測定內(nèi)源氮損失，外源指示劑三氧化二鉻（Cr2O3）的添加量為0.3%，對(duì)菜籽餅發(fā)酵前后的營養(yǎng)價(jià)值進(jìn)行評(píng)定。結(jié)果顯示，發(fā)酵菜籽餅的消化能（DE）和代謝能（ME）分別為12.11和10.99 MJ/kg，顯著高于菜籽餅（P<0.05）。發(fā)酵菜籽餅的干物質(zhì)和粗蛋白質(zhì)的表觀消化率較未發(fā)

6、酵的菜籽餅分別提高了7.67%和13.66%（P<0.05）；回腸粗蛋白質(zhì)表觀（真）消化率為79.38%（86.67%），均顯著高于菜籽餅（P<0.05）。除纈氨酸（Val）、苯丙氨酸（Phe）、精氨酸（Arg）和胱氨酸（Cys）外，發(fā)酵菜籽餅中必需氨基酸和非必需氨基酸的回腸表觀和真消化率均顯著高于菜籽餅（P<0.05）?；炀虘B(tài)發(fā)酵有效地改善菜籽餅的飼用品質(zhì)，顯著提高了菜籽餅養(yǎng)分消化利用率。
　　4.發(fā)酵菜籽餅在生長肥育豬日糧中

7、的應(yīng)用。選擇健康、體重均勻的三元雜交豬（杜×長×大，48±2.32kg）48頭，分為3組，每組2圈，每圈8頭（3公5母），均采用全自動(dòng)飼喂系統(tǒng)飼喂，試驗(yàn)日糧采用發(fā)酵菜籽餅等能等蛋白替代豆粕。試驗(yàn)豬分為生長階段（48~65kg）和育肥階段（66~90kg）。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧，生長階段：試驗(yàn)1組發(fā)酵菜籽餅替代30%豆粕，試驗(yàn)2組發(fā)酵菜籽餅替代60%豆粕。育肥階段：試驗(yàn)1組發(fā)酵菜籽餅替代50%豆粕，試驗(yàn)2組發(fā)酵菜籽餅替代100%豆粕。分別檢