楊梅主要過敏原分離純化以及免疫活性鑒定.pdf

1、對于大多數(shù)人來講，水果是一種健康食品，但有一部分人由于自身遺傳以及生活環(huán)境等因素，對某一種或者多種水果過敏。這種現(xiàn)象伴隨水果生產(chǎn)專業(yè)化以及銷售網(wǎng)絡(luò)全球化以及消費水果種類和數(shù)量的增加而更為普遍。水果過敏是患者的免疫系統(tǒng)發(fā)生紊亂而導(dǎo)致的，它主要是由于某些蛋白成分（過敏原）所引起的，一般屬于Ⅰ型超敏反應(yīng)（typeⅠ hypersensitivity），約1-3％的人群受到此類型疾病所困擾。因此，開展水果的過敏原研究對保護(hù)人們的生命健康、提高人

2、民生活質(zhì)量具有巨大的經(jīng)濟(jì)效益以及社會效益。本論文主要是從楊梅過敏原蛋白的分離純化以及純化產(chǎn)物的免疫學(xué)活性分析等方面進(jìn)行研究，得到如下結(jié)論:
　　首先，應(yīng)用Coca，s提取法提取楊梅果實中粗蛋白液，運用還原SDS-PAGE技術(shù)對楊梅粗提蛋白液進(jìn)行初步分析，顯示楊梅粗提蛋白中包含以前用過敏血清免疫印跡實驗鑒定為28 kDa的主要過敏原蛋白條帶。
　　其次，通過超濾離心法、SP-FF離子交換層析以及Superdex7510/300

3、 GL凝膠柱層析方法分別純化楊梅主要過敏蛋白。依據(jù)楊梅轉(zhuǎn)錄組推導(dǎo)的氨基酸數(shù)據(jù)，對楊梅主要過敏蛋白進(jìn)行肽段指紋圖譜、分子量質(zhì)譜測定以及酶聯(lián)免疫(ELISA)間接法分析與鑒定，得到楊梅主要過敏原理論分子量和質(zhì)譜檢測所得分子量一致，ELISA檢測后有很強(qiáng)的免疫活性，且肽段指紋圖譜匹配實驗與氨基酸序列比對得出楊梅主要過敏蛋白屬于幾丁質(zhì)酶第三家族(classⅢ chitinase)(已提交至NCBI數(shù)據(jù)庫，序列號:KP307670)。