微衛(wèi)星標(biāo)記技術(shù)定性、定量鑒定動(dòng)物源性成分的應(yīng)用研究.pdf

1、商品中動(dòng)物源成分的摻假、冒充、瞞報(bào)等關(guān)系食品安全的事件屢禁不止，損害著消費(fèi)者的權(quán)益，影響著市場(chǎng)秩序。瘋牛病的爆發(fā)，讓人們開(kāi)始重新思考飼料中添加動(dòng)物源成分的可行性。因此，商品之中動(dòng)物源成分的鑒定顯得越來(lái)越重要。隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，微衛(wèi)星DNA已被深入了解，微衛(wèi)星DNA遵循孟德?tīng)栠z傳定律，
　　 可以穩(wěn)定遺傳，被廣泛應(yīng)用于群體遺傳研究，但是關(guān)于應(yīng)用微衛(wèi)星標(biāo)記技術(shù)鑒別肉品的研究還鮮有報(bào)道。運(yùn)用微衛(wèi)星標(biāo)記技術(shù)建立一種快速、有效的動(dòng)

2、物源成分的檢測(cè)方法，確定動(dòng)物成分的物種，能幫助質(zhì)檢人員提高工作效率降低成本，快速控制動(dòng)物源性商品的隨意流通，擴(kuò)大食品安全控制范圍，滿足市場(chǎng)發(fā)展的檢測(cè)需要。
　　 本試驗(yàn)應(yīng)用微衛(wèi)星標(biāo)記技術(shù)鑒別商品中常見(jiàn)的動(dòng)物源性成分。采集市場(chǎng)上常見(jiàn)的豬、牛、綿羊、山羊、鴨、鵝、雞、狗為試驗(yàn)對(duì)象，從Gnenbank中初選出鴨、豬、牛、綿羊四種動(dòng)物的微衛(wèi)星標(biāo)記，通過(guò)對(duì)微衛(wèi)星標(biāo)記的序列設(shè)計(jì)引物，然后進(jìn)行PCR-凝膠電泳，篩選出每種動(dòng)物具有種內(nèi)通用、種間

3、特異的微衛(wèi)星標(biāo)記用以鑒定。試驗(yàn)結(jié)果表明:在豬、牛、綿羊、山羊、鴨、鵝、雞、狗的動(dòng)物源性成分中鑒定鴨源性成分采用鴨的特異性微衛(wèi)星標(biāo)記AJ272583，擴(kuò)增的目的片段為267bp;鑒定牛源性成分采用牛的特異性微衛(wèi)星標(biāo)記AB463，擴(kuò)增的目的片段為178bp;鑒定綿羊源性成分采用牛的綿羊的特異性衛(wèi)星標(biāo)記x89268，擴(kuò)增的目的片段為207bp;鑒定豬源性成分采用豬的特異性微衛(wèi)星標(biāo)記EF046，擴(kuò)增的目的片段為212bp。
　　 分別應(yīng)

4、用鴨的微衛(wèi)星標(biāo)記AJ272583、牛的微衛(wèi)星標(biāo)記AB463、綿羊衛(wèi)星標(biāo)記x89268、豬的微衛(wèi)星標(biāo)記EF046進(jìn)行熒光定量PCR，得到
　　 鴨源性成分肉的百分含量公式為C=10[(Ct-17.77)/-3.3844]×100％;
　　 牛源性成分肉的百分的含量的公式為C=10[(Ct-16.895)/-3.1275]×100％;
　　 綿羊源性成分肉的百分的含量的公式為C=10[(Ct-18.629)/-3.2