Ti-O膜表面固定不同手性胱氨酸及其催化釋放一氧化氮對內(nèi)皮細胞相容性影響的研究.pdf

1、生物體系的各層次均具有典型的手性特征，不同手性的分子往往具有不同的生物學功能。胱氨酸分子中二硫鍵具有催化內(nèi)源性一氧化氮供體釋放一氧化氮功能，本論文將不同手性的胱氨酸—L型胱氨酸和D型胱氨酸固定在Ti-O膜表面，考察不同手性胱氨酸固定對內(nèi)皮細胞粘附、增殖和遷移的影響，以及通過該方法構建的具有與正常內(nèi)皮細胞分泌一氧化氮速度相當?shù)囊谎趸尫艑?nèi)皮細胞上述行為以及分泌一氧化氮功能的影響。
　　首先采用非平衡磁控濺射法在單晶硅表面制備Ti

2、-O膜，然后在Ti-O膜表面沉積聚多巴胺，利用聚多巴胺作為中間連接層，將不同手性的胱氨酸固定到樣品表面。利用X射線光電子能譜(XPS)、原子力顯微鏡(AFM)、水接觸角測量等方法對改性后的樣品進行材料學的表征，利用一氧化氮體外催化釋放實驗評價固定不同手性胱氨酸樣品的催化能力，并且通過體外內(nèi)皮細胞培養(yǎng)實驗評價固定不同手性胱氨酸樣品的生物學性能。
　　原子力顯微鏡(AFM)結(jié)果表明，聚多巴胺沉積到Ti-O膜表面可形成一層均勻的膜，樣品

3、表面出現(xiàn)由于多巴胺自聚合而形成的顆粒狀凸起;在固定不同手性胱氨酸之后，樣品表面的粗糙度無顯著變化;X射線光電子能譜(XPS)結(jié)果表明，聚多巴胺成功的沉積在Ti-O膜表面，同樣的，不同手性的胱氨酸成功地固定在聚多巴胺表面，并且L型和D型胱氨酸在聚多巴胺表面的固定量幾乎是一致的;水接觸角檢測結(jié)果顯示，Ti-O膜表面沉積聚多巴胺之后，樣品表面親水性增加，固定不同手性胱氨酸之后，樣品表面的親水性降低，因手性分子物理性質(zhì)相同的特點，不同手性胱氨酸

4、樣品表面的水接觸角結(jié)果一致;然而，在吸附白蛋白過后不同手性胱氨酸樣品表面水接觸角結(jié)果出現(xiàn)了顯著的差異，這可能是白蛋白在不同手性表面的吸附行為不同造成的。
　　樣品催化內(nèi)源性一氧化氮供體釋放一氧化氮結(jié)果表明，兩種手性胱氨酸均能穩(wěn)定的催化釋放一氧化氮，然而，L型胱氨酸樣品催化釋放一氧化氮的速度顯著高于D型胱氨酸樣品相應值;內(nèi)皮細胞體外靜態(tài)培養(yǎng)結(jié)果顯示，無論有無一氧化氮供體存在，L型胱氨酸樣品表面內(nèi)皮細胞的粘附量、增殖量和遷移距離均要顯

5、著高于D型胱氨酸樣品表面相應值;不同手性胱氨酸樣品表面經(jīng)過胎牛血清浸泡后，L型胱氨酸樣品表面內(nèi)皮細胞的粘附量和增殖量要明顯高于D型胱氨酸和Ti-O膜表面相應值;在一氧化氮供體存在的條件下，不同手性胱氨酸樣品催化釋放一氧化氮作用于內(nèi)皮細胞后檢測培養(yǎng)基中氮化合物含量結(jié)果顯示，L型胱氨酸樣品催化釋放一氧化氮作用于內(nèi)皮細胞后，內(nèi)皮細胞培養(yǎng)不同時間段后，所取得的培養(yǎng)基中硝酸鹽、亞硝酸鹽含量要顯著高于D型胱氨酸樣品相應值。以上結(jié)果均表明，不同手性胱