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文檔簡介
1、菜籽多肽是菜籽蛋白水解后制備得到的具有一定生理活性的小分子短鏈肽,是菜籽粕深加工和利用的一個重要方向。本文以雙低菜籽粕為原料,采用堿提酸沉法提取制備了兩種分離蛋白,通過比較它們的化學(xué)組成和功能特性,選擇了菜籽蛋白得率較高和功能性良好的RP5.8作為后續(xù)酶解試驗。以菜籽蛋白RP5.8為原料,采用可控酶解技術(shù),以水解度為指標,通過其預(yù)處理、水解條件的優(yōu)化等制備菜籽多肽,并經(jīng)過.超濾膜粗分離,得到不同分子量的菜籽多肽,評價其體外醒酒活性和動物
2、試驗。主要研究結(jié)果如下:
(1)從雙低菜籽粕制備得到兩種菜籽蛋白分別為菜籽蛋白RP5.8和菜籽蛋白RP3.6,其得率分別為12.26%和7.74%,粗蛋白含量分別為70.66%和85.74%,水,分含量10.67%和6.89%,灰分含量分別為1.97%和5.12%。
(2)分析測定了兩種蛋白中各個氨基酸成分含量,兩種分離蛋白必需氨基酸含量均比較豐富,其中菜籽蛋白RP5.8的必需氨基酸含量占整個氨基酸總量的38.5%。
3、它們的氨基酸模式比較符合FAO/WHO兒童推薦模式,可以應(yīng)用到兒童食品中。
(3)通過比較兩種菜籽蛋白的溶解性等功能特性,菜籽蛋白RP5.8的溶解性和流變性較好,可以用于后續(xù)酶解試驗。而菜籽蛋白RP3.6的持水性、吸油性和乳化性,較好,可以作為肉制品的添加劑和蛋糕等的乳化劑。
(4)在菜籽蛋白酶解前預(yù)處理——加熱、超聲波、三聚磷酸鈉(STP)和琥珀酰酐等四種方式中,以水解度為指標,比較得到操作簡易且水解度較高的預(yù)處理
4、方式為超聲波處理。其預(yù)處理條件為超聲功率500 w,超聲時間30 min,超聲溫度為50℃,水解度為10.49±0.22%。
(5)在堿性蛋白酶酶解菜籽蛋白的單因素試驗基礎(chǔ)上,采用響應(yīng)面法對菜籽蛋白酶解工藝進行優(yōu)化,得到最優(yōu)酶解條件:pH為7.7,加酶量(E/S)為11.6%(v/w),溫度為52℃,實際測得菜籽蛋白水解度為12.29%。
(6)菜籽蛋白酶解液經(jīng)超濾得到RPU-Ⅰ(>5kDa). RPU-Ⅱ(1-5k
5、Da)和RPU-Ⅲ(<1kDa),其得率分別為30.72%,24.13%和0.5%。
(7)在RPU-Ⅰ(>5kDa)、RPU-Ⅱ(1-5kDa)、RPU-Ⅲ(<1kDa)和酶解原樣四個樣品中,RPU-Ⅰ的羥自由基清除能力最高,其值為56.45%。在動物試驗中,以樣品.RPU-Ⅰ(0.17g/0.5ml/只)和RPU-Ⅱ(O.1g/0.5ml/只)給實驗小鼠喂食,其醉酒率為0,這說明樣品RPU-Ⅰ和RPU-Ⅱ具有提高機體酒精耐
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