慶大霉素C1a發(fā)酵工藝研究.pdf

1、本文首先對(duì)初始菌株棘孢小單孢菌進(jìn)行復(fù)壯與自然分離，經(jīng)過(guò)初篩、復(fù)篩及傳代穩(wěn)定性試驗(yàn)，得到高產(chǎn)菌株SIPI-GM.13，搖瓶發(fā)酵效價(jià)為632μg/mL，比初始菌株的慶大霉素C1a效價(jià)444μg/mL提高了1.4倍。緊接著對(duì)菌株保藏方法進(jìn)行考察，并對(duì)斜面配方及培養(yǎng)條件進(jìn)行優(yōu)化，得到最終斜面配方（g/100mL）：可溶性淀粉1.5，麩皮3.0，MgSO4·7H200.05，L-天冬酰胺0.002，CaCO30.1，瓊脂條2.0，pH7.0，配制

2、水為飲用水，35℃培養(yǎng)7-8天，培養(yǎng)結(jié)束后放冰箱4℃保藏，7天后傳代。
　　將SIPI-GM.13作為工藝優(yōu)化的出發(fā)菌株，對(duì)初始的種子培養(yǎng)基配方、種子搖瓶培養(yǎng)條件，發(fā)酵培養(yǎng)基配方及其搖瓶培養(yǎng)條件進(jìn)行了一系列的優(yōu)化，通過(guò)試驗(yàn)得到了最佳的發(fā)酵培養(yǎng)基配方(g/100mL)：玉米淀粉4.5，玉米粉1.5，冷榨黃豆餅粉3.2，大豆蛋白胨0.8，KNO30.05，CaCO30.5，CoCl20.002，NaCl0.15, MgSO4·7H2O

3、0.1，(NH4)2SO40.5。并確定了較優(yōu)的培養(yǎng)條件：培養(yǎng)基消前pH8.2、搖瓶裝液量35mL/250mL、接種量11％（4.0mL/35mL）、35℃、240rpm，培養(yǎng)周期為4天。最終發(fā)酵效價(jià)為1322μg/mL，比初始的發(fā)酵效價(jià)提高了2.9倍。
　　在對(duì)慶大霉素C1a產(chǎn)生菌搖瓶發(fā)酵工藝優(yōu)化的同時(shí)，對(duì)發(fā)酵液的預(yù)處理方法以及HPLC檢測(cè)方法進(jìn)行了優(yōu)化。通過(guò)大量的試驗(yàn)，最終確定發(fā)酵液的預(yù)處理方法為：用4mol/L硫酸調(diào)pH至1