T-20化學(xué)修飾物的生物活性評(píng)價(jià).pdf

1、T-20是阻止HIV-1進(jìn)入宿主細(xì)胞的抗病毒融合抑制劑，但其極短的血漿半衰期限制了T-20的臨床應(yīng)用。為了促進(jìn)長效抗HIV多肽藥物的開發(fā)，本文使用HIV△ENV假病毒/Ghost細(xì)胞體系對11種T-20化學(xué)修飾物進(jìn)行了生物活性評(píng)價(jià)。首先以GFP報(bào)告基因質(zhì)粒作為表達(dá)載體，分別以Lipofectamine TM 2000和25KD線性PEI為轉(zhuǎn)染試劑，通過細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)對比了兩種轉(zhuǎn)染試劑對假病毒包裝細(xì)胞(293T)的轉(zhuǎn)染效率。其次，以PEI為

2、轉(zhuǎn)染試劑成功進(jìn)行了假病毒的包裝并測定了制備假病毒的感染活性。最后，將系列稀釋的修飾物與等量假病毒共孵育后感染Ghost-CXCR4細(xì)胞，根據(jù)不同稀釋度下假病毒Luc報(bào)告基因的表達(dá)量繪制出各種修飾物對假病毒的抑制曲線并得到了相應(yīng)半數(shù)抑制濃度(IC50)。結(jié)果顯示，PEI比Lipofectamine TM 2000對293T細(xì)胞系具有較高的轉(zhuǎn)染效率；假病毒對Ghost-CXCR4細(xì)胞的感染活性與病毒接種量呈正向線性關(guān)系；在11種修飾產(chǎn)物中C