產(chǎn)油脂酵母菌株的篩選.pdf

1、微生物油脂(microbial oils)又稱單細(xì)胞油脂(single cell oil，SCO)，即微生物以碳水化合物、碳?xì)浠衔锖推胀ㄓ椭瑸樘荚?、氮源、輔以無(wú)機(jī)鹽生產(chǎn)的油脂和另一些有商業(yè)價(jià)值的脂質(zhì)。隨著人口的增長(zhǎng)、社會(huì)的進(jìn)步使油脂需求量與自然資源短缺的矛盾日益加劇，環(huán)境污染日趨嚴(yán)重，開(kāi)發(fā)新型油脂資源及清潔能源是當(dāng)務(wù)之急。微生物生產(chǎn)油脂具有原料來(lái)源豐富、可再生、成本低、周期短、環(huán)境友好等優(yōu)點(diǎn)，已引起人們的高度關(guān)注。開(kāi)展微生物油脂的研究

2、對(duì)解決人類面臨的資源短缺、環(huán)境惡化、人類健康等現(xiàn)實(shí)問(wèn)題具有重要意義。本論文從產(chǎn)油脂菌株的篩選開(kāi)始，并對(duì)菌株產(chǎn)油脂發(fā)酵工藝條件進(jìn)行了系統(tǒng)研究，主要研究結(jié)果如下： 以蘇丹黑染色觀察脂肪粒大小為指標(biāo)，從20份土樣中初步分離篩選到170支產(chǎn)油脂酵母菌株。經(jīng)搖瓶初篩、復(fù)篩考察了產(chǎn)油菌株的葡萄糖利用速率和油脂得率情況，獲得一支油脂得率較高的酵母菌株6-18，油脂含量達(dá)36.68％，并且香氣濃郁。通過(guò)細(xì)胞形態(tài)、生理生化特征觀察及26SrDNA

3、 D1/D2擴(kuò)增及序列分析，菌株6-18初步鑒定為隱球酵母屬的Cryptococcus aerius種(登錄號(hào)：FJ606683)。目前，尚未見(jiàn)Cryptococcusaerius產(chǎn)油脂的報(bào)道。 本文研究比較了索氏抽提法、有機(jī)溶劑法和酸熱法測(cè)定油脂的效果差異，發(fā)現(xiàn)酸熱法測(cè)定酵母油脂簡(jiǎn)便、快捷，該法應(yīng)用于菌株條件優(yōu)化中的產(chǎn)物測(cè)定，提高了工作效率。 采用單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)對(duì)菌株6-18的發(fā)酵產(chǎn)油脂培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件進(jìn)行了優(yōu)化

4、，確定了最佳產(chǎn)油脂發(fā)酵培養(yǎng)基：葡萄糖120g/L，硝酸鉀1g/L，玉米漿2.5g/L，C/N:400，磷酸氫二鉀2g/L，七水合硫酸鎂1.5g/L，硫酸錳2mg/L;確定了較優(yōu)培養(yǎng)條件為：培養(yǎng)溫度28℃，接種量10％，發(fā)酵時(shí)間96h，起始pH7.0。菌株6-18在最佳培養(yǎng)基和較優(yōu)培養(yǎng)條件下培養(yǎng)，油脂得率達(dá)19.03 g/L，菌體生物量29.50g/L；油脂含量64.52％。產(chǎn)脂條件優(yōu)化后菌株6-18的油脂產(chǎn)量是優(yōu)化前的3倍，且性能穩(wěn)定。