運(yùn)動(dòng)發(fā)酵單胞菌和大腸桿菌間穿梭質(zhì)粒載體的構(gòu)建.pdf_第1頁
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1、天津大學(xué)碩士學(xué)位論文運(yùn)動(dòng)發(fā)酵單胞菌和大腸桿菌間穿梭質(zhì)粒載體的構(gòu)建姓名：高衛(wèi)華申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：化學(xué)工藝指導(dǎo)教師：張敏華20040701ABSTRACTZymomonasmobilisisafacultativeanaerobicgramnegativebacterium.BecausetherateofsugarupdateandethanolproductionisbetterthanthatofSaccharomycescer

2、evisae為momonasmobilisisconsideredtobeastrainofpotentialdevelopmentinethanolmanufacture.HoweverthefermentationmaterialusedbyZymomonasmobilisislimitedtoglucosefructoseandsucrose.Toexpandthefermentationrawmaterialrangeeffor

3、thasbeenmadetointroduceheterologousgenesrelatedtoxylosemetabolismintoZymomonasmobilisbygeneticmanipulation.Inthispaperanewshutlevectorbe吸weenZmobilisE.cohisconstructedbyinsertingthe2.7kilobasepair(kb)crypticplasmidpZM2of

4、ZymomonasmobilisATCC10988intotheEscherichiacolivectorpBR328inthesiteofSphldigests.Thenewvector7.656kbplasmidpZBlhastwoselectivemarkersAprandCm`.ThereareseveraluniquerestrictionsitesoneachselectivemarkerAhdIPstlPvuIsiteso

5、nthemarkerofAp`andPspEcoRlNcolonthemarkerofCm`.TherecombinantplasmidpZBIhasbeenclonetoE.coliDH5aandZmobilisCP4successfullyanditsinbothhoststrainshasbeenexamined.InthispaperthegrowthofZmobilisATCC10988andCP4indifferentmed

6、iumiscompared.TheresultsshowthattheTmediumgivesthebeterculture.Twodifferentmethods“SDSalkali“methodand“Nester“methodforpreparingplasmidsofZmobilishavebeencomparedinthispaper.TheplasmidpZM2hasbeencharacterizedbyrestrictio

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