固定化細(xì)胞酶法轉(zhuǎn)化淀粉質(zhì)生產(chǎn)海藻糖技術(shù)研究.pdf

1、海藻糖是由兩個(gè)葡萄糖分子構(gòu)成的非還原性糖，有些生物體在惡劣的環(huán)境下，如高溫、干旱、脫水、冷凍、高滲透壓及有毒物質(zhì)，會(huì)顯示出較強(qiáng)的抵抗力，這與其體內(nèi)存在海藻糖是密切相關(guān)的其獨(dú)特的性質(zhì)，使生物體的細(xì)胞，蛋白質(zhì)，脂肪，碳水化合物，核酸等物質(zhì)將不會(huì)受到影響，以維持細(xì)胞活力。外生海藻糖生物體和生物大分子同樣能夠起到良好的非特異性保護(hù)作用，因此，海藻糖被廣泛應(yīng)用于各行業(yè)，如食品，醫(yī)藥，農(nóng)業(yè)，化妝品等。海藻糖是由兩個(gè)葡萄糖分子構(gòu)成的非還原性糖，一些生

2、物當(dāng)遭遇惡劣的環(huán)境時(shí)會(huì)表現(xiàn)出一定的耐受性，其內(nèi)源的海藻糖會(huì)使得生物體細(xì)胞的一些活性物質(zhì)保持原有結(jié)構(gòu)，使得細(xì)胞仍有活性。因此，海藻糖被廣泛應(yīng)用于各行各業(yè)，如食品、醫(yī)藥、農(nóng)業(yè)、化妝品等等。但由于海藻糖的制備和分離提純比較困難，限制了它的應(yīng)用。目前用于海藻糖制取的方法中，常用的是酶轉(zhuǎn)化法，本研究采用海藻糖合酶酶法合成海藻糖，研究?jī)?nèi)容包括：以嗜熱芽孢菌株(Bacillus thermophilic)為出發(fā)菌株，選育產(chǎn)生海藻糖合酶的高產(chǎn)菌株，進(jìn)行

3、菌株的初步鑒定，毒理測(cè)定等；產(chǎn)海藻糖合酶菌株的分離純化，以及生理生化特性的測(cè)定；選擇合適的固定化載體及活性基團(tuán)的激活，確定細(xì)胞的固定條件，固定化細(xì)胞的催化特性及活力測(cè)定；固定化細(xì)胞連續(xù)化使用條件的優(yōu)化；研究開(kāi)發(fā)海藻糖的分離和提取工藝，制備出高純度的海藻糖產(chǎn)品。
　　本研究獲得高效表達(dá)TreS合酶重組枯草芽孢桿菌，并成功表達(dá)海藻糖合酶，進(jìn)行重組枯草芽孢桿菌搖瓶培養(yǎng)條件及培養(yǎng)基的優(yōu)化，以乳糖作為誘導(dǎo)劑，誘導(dǎo)時(shí)間為對(duì)數(shù)中后期。無(wú)機(jī)氮源有