糖化酶工業(yè)生產(chǎn)菌株選育及其種子制備工藝優(yōu)化.pdf

1、糖化酶，全名葡萄糖淀粉酶(Glucoamylase EC.3.2.1.3)，是水解淀粉的主要酶類(lèi)，廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)藥、發(fā)酵等工業(yè)。作為我國(guó)酶制劑中的支柱產(chǎn)品，糖化酶產(chǎn)品已成為酶制劑產(chǎn)品中產(chǎn)量最大的品種，出口亦達(dá)到較大的數(shù)量，但是當(dāng)前的問(wèn)題是產(chǎn)品售價(jià)已降至接近制造成本，企業(yè)獲利甚微。因此，進(jìn)一步選育糖化酶高產(chǎn)菌株，縮短發(fā)酵生產(chǎn)周期，降低生產(chǎn)成本，對(duì)糖化酶的工業(yè)生產(chǎn)仍然具有十分重要的意義。
　　 本文以獲得高糖化酶活性菌株為目標(biāo)，

2、通過(guò)對(duì)實(shí)驗(yàn)室保藏的糖化酶工業(yè)生產(chǎn)菌株黑曲霉CICIM GAH14進(jìn)行多次低能N+離子束誘變，最終篩選出了一株糖化酶高產(chǎn)菌株38-3，其糖化酶產(chǎn)酶水平較出發(fā)菌株高出31.7％。經(jīng)過(guò)5代遺傳穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，連續(xù)傳5代，38-3菌株產(chǎn)酶活力維持穩(wěn)定，具有良好的遺傳穩(wěn)定性。本研究中，建立了一種以潮霉素抗性為檢測(cè)指標(biāo)的新的誘變育種初篩方法，以之為初篩手段，經(jīng)過(guò)多輪復(fù)篩及傳代驗(yàn)證篩選得到了38-3菌株，證明該方法是一種行之有效的新方法。

3、　　 為了提高糖化酶工業(yè)生產(chǎn)菌種的研究和應(yīng)用效率，針對(duì)絲狀真菌形態(tài)變化對(duì)產(chǎn)酶的影響，本文以糖化酶工業(yè)生產(chǎn)菌株黑曲霉GB0506為出發(fā)菌株，在該菌原始培養(yǎng)流程的基礎(chǔ)上對(duì)其活化培養(yǎng)基配方及種子液體培養(yǎng)方法進(jìn)行了改良。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在固體活化培養(yǎng)基中添加0.2％的酵母粉及1％的玉米淀粉，有利于在保持原有酶活力的基礎(chǔ)上加速菌體生長(zhǎng)；加入40粒，粒徑3～4mm的玻璃珠130r/min，搖床培養(yǎng)可以獲得更為分散、均一利于發(fā)酵的種子液；液體種子制備