γ-氨基丁酸高產(chǎn)菌株的選育.pdf

1、γ-氨基丁酸(γ-Aminobutyric acid，GABA，簡(jiǎn)稱(chēng)GABA)，又稱(chēng)氨酪酸，是一種廣泛存在于原核生物和真核生物的非蛋白質(zhì)氨基酸，是哺乳動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)中一種重要的抑制性神經(jīng)遞質(zhì)，對(duì)人體具有多種生理功能，如抗心律失常、降血壓、改善腦機(jī)能、調(diào)節(jié)心血管、增強(qiáng)記憶、鎮(zhèn)靜安神、活化肝腎。目前GABA作為重要的新型功能因子在食品藥品領(lǐng)域中有廣泛的應(yīng)用。自然界中，GABA廣泛存在于動(dòng)植物和微生物中，但GABA在動(dòng)物和植物中含量較低，不

2、容易被提取，因此目前微生物是GABA的主要來(lái)源。用于生產(chǎn)GABA的菌株有乳酸菌、大腸桿菌和酵母菌等。
　　 本文以實(shí)驗(yàn)室保存的的一株GABA產(chǎn)量較高乳酸片球菌(Pediococcusacidilactici)(經(jīng)氨基酸分析及GABA含量測(cè)定得知，乳酸片球菌產(chǎn)GABA量1.062g/L)為出發(fā)菌株，經(jīng)過(guò)UV誘變、NTG誘變和Uv、NTG復(fù)合誘變，得到一株產(chǎn)GABA較高的突變株UN-27。最佳誘變劑量為紫外照射時(shí)間20s，距離25c

3、m，NTG濃度為0.3mg/mL，誘變處理時(shí)間為60min。將UN-27連續(xù)傳代10次后，發(fā)現(xiàn)其遺傳性狀穩(wěn)定。經(jīng)氨基酸分析儀測(cè)定，誘變后菌株GABA產(chǎn)量達(dá)到5.017g/L，是出發(fā)菌株產(chǎn)量的4.72倍。為了獲得更高的GABA產(chǎn)量，對(duì)UN-27的培養(yǎng)基和發(fā)酵條件進(jìn)行了優(yōu)化。應(yīng)用Box-Behnken響應(yīng)面法對(duì)影響因素進(jìn)行優(yōu)化，通過(guò)Design-Expert軟件對(duì)數(shù)據(jù)回歸擬合，得到最佳發(fā)酵培養(yǎng)基配方(g/L)為：葡萄糖15，酵母粉20，蛋白