大豆蛋白抗高血壓活性肽的研究.pdf

1、本論文以大豆分離蛋白為原料,通過選取的堿性內(nèi)切蛋白酶、As1.398中性蛋白酶、復(fù)合蛋白酶和復(fù)合風(fēng)味蛋白酶對大豆分離蛋白進行水解,研究大豆蛋白酶法水解的溫度、pH、酶與底物濃度之比(E/S)和底物濃度(S)等單因素最佳水解條件.利用正交實驗,得到影響大豆蛋白水解的最佳條件為:(1)堿性內(nèi)切蛋白酶的最佳水解條件:pH=7.5,T=60℃,E/S=4％,S=5％.(2)復(fù)合風(fēng)味蛋白酶的最佳水解條件:pH=6.5,T=50℃,E/S=8％,S

2、=4％.(3)As1.398中性蛋白酶的最佳水解條件:pH=7.0,T=55℃,E/S=4％,S=5％.(4)復(fù)合蛋白酶的最佳水解條件:pH=7.5,T=55℃,E/S=11％,S=3％.研究單酶在最適水解條件下,不同水解時間水解產(chǎn)物對血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(ACE)的抑制活性.其中復(fù)合風(fēng)味蛋白酶水解產(chǎn)物抑制效果最佳,水解8小時,對ACE半抑制濃度達到0.846mg/ml.同時采用同步加酶、分步加酶協(xié)同作用方式,不同水解時間水解產(chǎn)物對ACE的

3、抑制活性.其中復(fù)合風(fēng)味+復(fù)合蛋白酶同步加酶水解產(chǎn)物抑制效果較好,水解1小時,對ACE半抑制濃度達到1.158mg/ml.復(fù)合風(fēng)味+復(fù)合蛋白酶分步加酶水解產(chǎn)物抑制效果較好,水解24小時,對ACE半抑制濃度達到0.962mg/ml.采用Sephadex G-25柱層析法,對抗高血壓活力最強的大豆蛋白復(fù)合風(fēng)味蛋白酶水解物進行粗分離,可得4個抗高血壓肽段,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線所得回歸方程y=-0.0232x+5.077可推測出,其分子量為5826.32