生物檢測用超小尺寸磁性納米探針研究.pdf

1、基于磁性納米粒子的磁性納米探針已經越來越多地被應用于生物醫(yī)學檢測領域。尺寸是衡量磁性納米探針的一個重要指標，制備出穩(wěn)定的超小磁性納米粒子以及構建功能化的超小磁性納米探針，對于腫瘤的早期診斷、治療效果及預后評價將有極其重大的意義。本文采用二巰基丁二酸作為修飾材料，用它取代油酸包裹的四氧化三鐵磁性納米粒子表面的油酸分子，制備出水溶性好、穩(wěn)定性能高、適合生物醫(yī)學應用的超小磁性納米粒子。并利用它們構建出體內外靶向食道癌細胞的超小磁性納米探針。論

2、文的主要工作包括以下幾個方面：
　　 1．通過氧化共沉淀法，制備出油酸包裹的四氧化三鐵磁性納米粒子(OA-USPIO);用二巰基丁二酸對其表面進行修飾得到樣品(DMSA-USPIO);并用TME、FTIR、TGA、VSM等表征其形貌結構、尺寸、表面功能基團及磁性。電鏡結果表明，兩種粒子都呈近球形，尺寸分別只有4.65和5.56nm;紅外分析兩者都具有特征吸收峰；TGA分析，得修飾在超小磁性納米粒子上的OA和DMSA分別占總質量的

3、31.8％和24.2%;VSM表明兩種粒子都具有超順磁性，飽和磁化強度分別為34.47和34.21emu/g;ELISA實驗得DMSA-USPIO(2.79×10-7M)關于TMB的Km值為0.255mM，關于H2O2的Km值為237mM，揭示了其具有模擬酶催化活性；DMSA-USPIO的弛豫率測定結果為r1=0.76，r2=17.2mM-1s-1，弛豫率比值r2/r1等于22.6，揭示了其可以作為一種優(yōu)良的T2造影劑。
　　

4、2．利用尼妥珠單抗，在偶聯(lián)劑（EDC/NHS）的作用下，構建了一種新型的體內外靶向食道癌細胞的超小磁性納米探針(NTZ-DMSA-USPIO probe)。用凝膠色譜法純化超小磁性納米探針，除去了游離的抗體；紫外分析表明不同抗體制備納米探針有所不同，而100μlEDC的用量對于探針的制備相對來說更理想；ELISA實驗比較了超小磁性納米粒子和超小磁性納米探針的模擬酶催化性能，揭示了超小磁性納米探針可以被用于生物檢測：最后用DLS進行了水動

5、力尺寸表征，游離的BSA，超小磁性納米粒子，BSA封閉的超小磁性納米探針的尺寸分別是5.6nm，24.4nm和35.8nm。
　　 3．將該超小磁性納米探針用于免疫組化檢測和MRI磁共振成像實驗，分別于體外體內對它們的檢測效果進行了評價。從免疫組化實驗結果可以看到，偶聯(lián)了尼妥珠單抗的超小磁性納米探針（實驗組），在抗原抗體作用下，與食道癌細胞膜上的EGFR受體結合．通過免疫組化實驗DAB染色之后，在細胞膜上出現(xiàn)了褐色的沉淀，而辣根