非水毛細(xì)管電泳與液相色譜用于胺類和肽類化合物的分離.pdf

1、毛細(xì)管電泳法(CE)和高效液相色譜法(HPLC)是兩種應(yīng)用極為廣泛的現(xiàn)代分離分析技術(shù)，它們都具有高效、快速、自動化程度高和樣品消耗少等優(yōu)點(diǎn)，在十幾年的時(shí)間里，特別是在最近幾年，受到了分離分析科學(xué)家的極大關(guān)注，已成為生物化學(xué)和分析化學(xué)中最受矚目，發(fā)展最快的兩種分離分析新技術(shù)。
　　非水毛細(xì)管電泳(NACE)是毛細(xì)管電泳的一個(gè)分支，不僅具有一般模式的特點(diǎn)，而且具有自己獨(dú)特的特點(diǎn)與優(yōu)勢。其研究范圍在不斷擴(kuò)大，其中包括無機(jī)離子、中性物質(zhì)、

2、有機(jī)酸、多肽、藥物的分離等，涵蓋了基礎(chǔ)研究與分析應(yīng)用兩個(gè)方面。但目前很多非水溶液的物理化學(xué)性質(zhì)還不是很清楚，而且有機(jī)試劑的種類繁多，這都給試劑的選擇帶來一定的困難。對溶劑系統(tǒng)選擇的規(guī)律和優(yōu)化方法的研究應(yīng)是今后一段時(shí)間的研究重點(diǎn)，為研究者提供了不少課題。
　　氨基酸和小肽是與生命活動有關(guān)的最基本的物質(zhì)，在生物體內(nèi)的新陳代謝和生理過程中起到了不可替代的作用。所以研究氨基酸和小肽的毛細(xì)管電泳分離，在醫(yī)藥、食品、衛(wèi)生等領(lǐng)域具有非常重要的意

3、義。但是大多數(shù)氨基酸和肽沒有和只有微弱的紫外吸收，直接紫外檢測滿足不了低含量組分測定的要求。目前廣為應(yīng)用的衍生試劑主要有9-芴甲氧羰基氯(FMOC)、鄰苯二甲醛(OPA)和5-二甲氨基萘-1-磺酰氯(DNS-C1)，但是這些衍生試劑本身的一些特性決定了其應(yīng)用的局限性。芳胺類物質(zhì)毒性比較高，主要通過皮肽、呼吸道和消化道進(jìn)入人體，它的毒性和潛在的致癌性給人們的同常生活帶來了巨大的隱患。因此，分析和檢測芳胺類物質(zhì)非常必要，必須建立一種簡單、快

4、速、靈敏度高的測定方法。
　　本文用實(shí)驗(yàn)室自行合成的新型衍生試劑，分別對氨基酸、小肽和芳香胺進(jìn)行衍生，再用非水毛細(xì)管電泳技術(shù)分別對氨基酸和小肽的衍生物進(jìn)行分離，用高效液相色譜技術(shù)對芳胺類衍生物進(jìn)行分離分析。
　　論文分四章：
　　第一章：
　　簡單介紹了毛細(xì)管電泳的發(fā)展及其在藥物分析、生物分子分離、基因工程研究、臨床醫(yī)學(xué)等各方面的應(yīng)用，并對非水毛細(xì)管電泳分離被分析物的模式及其相關(guān)的基礎(chǔ)知識進(jìn)行闡述。
　　第

5、二章：
　　非水毛細(xì)管電泳對多種氨基酸衍生物進(jìn)行分離。首先采用新合成的紫外衍生試劑10-乙基吖啶酮-2-磺酰氯對氨基酸混合物進(jìn)行衍生，然后用毛細(xì)管電泳非水模式實(shí)現(xiàn)多種衍生物的分離，并且討論了分離測定需要優(yōu)化的多個(gè)參數(shù)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果令人滿意。
　　第三章：
　　以10-乙基吖啶酮-2-磺酰氯作柱前衍生試劑，采用非水毛細(xì)管電泳模式考察并優(yōu)化多種小肽的分離條件。不加其他添加劑可實(shí)現(xiàn)五種小肽高效基線分離，并在最優(yōu)化條件下對樣品進(jìn)行

6、了測定，結(jié)果令人滿意。
　　第四章：
　　簡要介紹色譜法的原理和分類，重點(diǎn)闡述高效液相色譜的發(fā)展和實(shí)際應(yīng)用，并用高效液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對染料中芳胺類衍生物進(jìn)行分離。熒光標(biāo)記試劑2-[2-(7H-二苯并[a，g]咔唑)]-異丙基氯甲酸酯(DBCPC-C1)作為柱前衍生試劑，用于芳胺類化合物的高效液相色譜-質(zhì)譜檢測，通過對衍生化反應(yīng)條件和色譜條件的優(yōu)化，建立了芳胺類化合物的柱前衍生高效液相色譜熒光檢測法，并將該方法應(yīng)用于相關(guān)