裂蹄木層孔菌發(fā)酵工藝及其發(fā)酵菌絲藥效研究.pdf

1、裂蹄木層孔菌(Phellinus linteus)是一種藥用真菌，屬于針層孔菌屬。中國古籍藥典中有記載，裂蹄木層孔菌具有促進血液循環(huán)和增強解毒等功效。隨著現(xiàn)代醫(yī)學和生物技術(shù)的不斷發(fā)展，許多學者對裂蹄木層孔菌具有出眾的抑制腫瘤以及提高機體免疫的能力進行了深入并且廣泛的研究，特別是從裂蹄木層孔菌中尋找新的抗腫瘤化合物的研究，已經(jīng)成為藥用真菌研究的一個熱點。最近的研究揭示裂蹄木層孔菌和現(xiàn)有化療藥物共同作用時，具有增強化療藥物藥效的作用，這引起

2、了研究人員更廣泛的關(guān)注。
　　 裂蹄木層孔菌野生資源非常匱乏，不但產(chǎn)量小而且采摘困難，不僅如此，由于環(huán)境污染等問題，使得這種珍稀藥用真菌的研究和大規(guī)模的利用面對著非常嚴竣的資源問題。我們使用液體深層發(fā)酵的技術(shù)解決了這一問題，得到最優(yōu)培養(yǎng)基組成為：葡萄糖5％，牛肉膏1.5％，豆餅粉0.75％，硫酸鎂0.06％，磷酸氫二鉀0.06％。最優(yōu)的發(fā)酵條件為：發(fā)酵時間，9天；發(fā)酵溫度，27.5℃，初始pH，6.0；搖床轉(zhuǎn)速，175rpm；接

3、種量，10％。用最優(yōu)培養(yǎng)基發(fā)酵驗證發(fā)酵得到菌絲干重為30.891±0.885g/L，胞外多糖產(chǎn)量為2.651±0.075g/L，分別是優(yōu)化前的1.5倍和2.5倍。
　　 實驗證實裂蹄木層孔菌胞外多糖具有抗腫瘤的能力，當0.75mg/ml的裂蹄木層孔菌胞外多糖作用72h后，人胃癌腫瘤細胞系SGC-7901的腫瘤細胞抑制率可以達到34.5％。裂蹄木層孔菌胞外多糖可以增敏阿霉素誘導(dǎo)的腫瘤細胞的凋亡，在阿霉素亞毒性濃度的時候可以顯著提高

4、腫瘤抑制效率，0.1ug/ml阿霉素作用72h后，腫瘤細胞抑制率為43.89％，而加入0.25mg/ml的裂蹄木層孔菌胞外多糖協(xié)同作用72h后，腫瘤細胞的抑制率就可以達到66.13％。
　　 動物實驗結(jié)果表明，250mg/kg的裂蹄木層孔菌醇提物單獨作用時可以顯著減小胃癌腫瘤，而它在不同濃度下(125、250和500mg/kg)協(xié)同30mg/kg環(huán)磷酰胺共同作用，均可以顯著減小腫瘤，值得我們注意的是，裂蹄木層孔菌醇提物對化療藥物